[发明专利]药用层孔菌中三种单体化合物的抗肿瘤活性及其在医药中的应用

说明书

技术领域：

本发明公开了药用层孔菌中三种单体化合物的抗肿瘤活性，研究表明这三个化合物对H₂₂荷瘤具有较好的抑制作用及其对人肝癌细胞SMMC-7721和人乳腺癌细胞MCF-710均有较好的杀伤作用。属于中药有效成分提取制备及其在医药和保健品领域中的应用。

背景技术：

癌症，亦称恶性肿瘤。20世纪70年代以后，癌症的发病人数以每年3％-5％的速度递增。癌症严重危害人类健康，已成为仅次于心血管病的人类第二杀手。据不完全统计，我国每年新增癌症患者180万，死亡140万，平均每分钟就有1.3人死于癌症。癌症的发生与环境的改变有着密切的关系，其给人类造成的危害主要是细胞恶性增殖造成机体重要生命活动器官的毁损和肿瘤的广泛扩散转移而导致病人死亡。目前治疗癌症多为药物与化疗相结合的方法，而该方法多具毒副作用。从天然动、植物中寻找低毒、高效的抗癌活性成分是近年来国内外癌症防治研究的热点之一。美国、欧洲、日本及我国相继开展了从天然可食植物或中药中筛检抗癌物的研究。真菌作为自然界中的一大类群，以其毒副作用小和显著的抗肿瘤、增强免疫等功效，被国内外学者所重视。

真菌中的三萜类物质具有抑制肿瘤细胞生长、止痛、镇静、抗过敏、消炎、解毒、护肝、降血压、降血脂等功效。并且该类化合物可以通过发酵的方法大量富集。关于这三种单体的抗肿瘤活性及其应用的研究却至今未见详细报道。

发明内容：

本发明公开了药用层孔菌中三种单体化合物的体内外抗肿瘤活性，这三种化合物能够明显地改善机体免疫功能和杀伤癌细胞。

按药剂学方法，可以将本发明药用层孔菌中三种单体化合物制成多种临床药物剂型作为治疗肿瘤的药物，所说的药剂是任何一种药剂学上所说的剂型

本发明的药物组合物含有疗效有效量的这三种单体为活性成分，以及含有一种或多种药学上可以接受的载体。

上述的载体是指药学领域常规的药物载体，包括稀释剂、赋形剂、填充剂、黏合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体。

本发明可以组合物的形式通过口服、静脉、肌肉注射或胃肠外给药方式施用于这种治疗的患者。按照药学领域的常规生产方法制备各种剂型如片剂、颗粒剂、冲剂、胶囊、栓剂、喷雾剂、缓释剂和注射剂。也可使其活性成分与一种或多种载体或药物组合，制成所需剂型。

本发明公开了这三种化合物化学名称及化学结构。其中化合物一为3-酮基-去氢硫色多孔菌酸，化合物二为3α，5α-二羟基-8，24-羊毛甾二烯-21-酸，化合物三为齿孔酸。其结构如下。

化合物1   化合物2    化合物3

下述的药理实验证实了这三种单体化合物具有治疗和预防肿瘤的药理活性。

药用层孔菌中三种单体化合物抗肿瘤活性的检测

摘要方法：采用MTT法及H₂₂荷瘤小鼠模型检测这三种化合物体内外抗肿瘤活性。结果：①体内结果表明化合物1当剂量为6mg/kg/d时，抑瘤率最高可达到68.58％；化合物2当剂量为15mg/kg/day时，抑瘤率最高可达到75.13％；化合物3剂量为15mg/kg/day时，抑瘤率最高可达到53.58％。②体外研究结果表明化合物1对人肝癌细胞SMMC-7721和人乳腺癌细胞MCF-710均有较好的杀伤作用，其细胞杀伤率最大分别为83.30％和73.31％，化合物2细胞杀伤率最大分别为77.52％和79.29％；化合物3细胞杀伤率最大分别为60.73％和49.58％，并能够明显地改善小鼠机体免疫功能。

结论：这三种单体化合物具有较好的抗肿瘤活性，能够明显地改善机体免疫功能和杀伤癌细胞。

1材料

1.1药物：3-酮基-去氢硫色多孔菌酸，3α，5α-二羟基-8，24-羊毛甾二烯-21-酸及齿孔酸由本实验室分离得到；注射用环磷酰胺(CTX)，5-氟尿嘧啶(5-Fu)，购于吉林省肿瘤医院。MTT(Amresco)；DMSO(北京化工厂)。

1.2动物：昆明小鼠100只，雌性，体重18～22g。购自吉林大学基础医学动物中心。

1.3仪器：酶标仪(Multiskan)；离心机(SORVALL)；二氧化碳培养箱(NAPCO法国)。

2方法和结果

2.1方法