[发明专利]真空干燥蛋白的方法、制得的蛋白产品和试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种真空干燥蛋白的方法和以该方法制得的蛋白产品和包含该蛋白产品的试剂盒。

背景技术

干燥是从各种物料中去除湿分的过程，各种物料可以是固体、液体或气体，固体又可分大块料、纤维料、颗粒料、细粉料等等，而湿分一般是物料中的水分，也可以是其它溶剂。在生物药品和生物制剂中，溶剂为各种缓冲液和水分。常用的干燥法从物料温度是否变化，可以分为恒温干燥、加热干燥和低温干燥。在生物制品中，常用的为恒温干燥和低温干燥。

比较常用的低温干燥主要为真空冷冻干燥。真空冷冻干燥是先将湿物料在共晶点(三相点)温度以下冻结，使水分(液体)变成固态的冰，然后在适当的真空度下，使冰直接升华为水蒸汽，再用真空系统中的冷凝器将水蒸汽冷凝，获得干燥的制品以达到长期保存的目的。该方法具有真空和低温两个特殊的优良条件，具有多个优点，适用范围广。

但是真空冷冻干燥的缺点主要是：干燥速率低、干燥时间长、干燥过程能耗高和干燥设备投资大等。

而相对于真空冷冻干燥，在保持生物样品活性的条件下，采用真空干燥，可以节省能耗，减少设备费用。真空干燥是指在负压下进行的干燥方法，原理是利用真空环境下液体沸点降低的特点来干燥物品。在化工领域和药品领域，真空干燥应用较多；而在生物制品领域，由于生物制品，尤其是蛋白，在常温下容易失去生物活性，因此鲜有人尝试真空干燥。

发明内容

本发明的目的是提供一种常温下真空干燥蛋白的方法，以及采用该方法制得的含有稳定蛋白的产品、容器和试剂盒。

本发明的真空干燥蛋白的方法，包括以下步骤：

(1)、将蛋白与海藻糖混合，其中蛋白的量为2.5～10μg，海藻糖的添加量是1～5wt％；可以适量添加血液抗凝剂，优选地，添加1wt％的肝素钠；

(2)、将样品分装至容器中，不加盖，置于真空干燥机中真空干燥，温度为20℃～30℃、优选为25℃，真空度＜100Pa、优选为2～100pa，干燥2小时；干燥后，取出样品置于生物安全柜里加盖密封；

(3)、采用Co60在常温下对蛋白质进行辐照灭菌，辐照强度为1kGy、2kGy、4kGy或6kGy，时间为1小时。

优选地，所述步骤(1)中还包括混合有甘氨酸和/或赖氨酸，以避免辐照给蛋白带来的交联现象，其中，甘氨酸、赖氨酸的浓度均为1wt％。

作为优选实施方式，混合样品分装于采血管中，采血管中没有其它添加剂。

作为优选实施方式，本方法中的蛋白是结核杆菌特异性融合蛋白TB1、TB2、TB1和TB2的混合物、或伽马干扰素，其中TB1、TB2蛋白的氨基酸序列如序列号No.1和No.2所示。

本方法提供一种用来检测潜伏性结核杆菌感染的蛋白产品，该蛋白产品包含结核杆菌特异性融合蛋白TB1、TB2、TB1和TB2的混合物，其中TB1、TB2蛋白的氨基酸序列如序列号No.1和No.2所示。

该蛋白产品通过以下方法真空干燥而得：

(1)、将蛋白、海藻糖和肝素钠混合，其中蛋白的量为2.5～10μg，海藻糖的添加量是1～5wt％，肝素钠的添加量是1wt％；

(2)、将样品分装至容器中，不加盖，置于真空干燥机中真空干燥，温度为20℃～30℃、优选25℃，真空度＜100Pa、优选2～100Pa，干燥2小时；干燥后，取出样品加盖密封；

(3)、采用Co60在常温下对蛋白质进行辐照灭菌，辐照强度为1kGy、2kGy、4kGy或6kGy，时间为1小时。

优选地，所述步骤(1)中还包括混合有甘氨酸和/或赖氨酸，以避免辐照给蛋白带来的交联现象，其中，甘氨酸、赖氨酸的浓度均为1wt％。

作为优选实施方式，TB1、TB2或伽马干扰素干燥在真空采血管中；TB1、TB2可以干燥在同一个真空采血管中，也可以干燥在不同的真空采血管中。

本发明提供一种试剂盒，所述试剂盒包括采用本发明方法制得的含有结核杆菌特异性融合蛋白TB1、TB2、或TB1和TB2混合物的容器、和含有伽马干扰素的容器，其中TB1、TB2或TB1和TB2混合物或伽马干扰素通过本发明的真空干燥方法干燥在容器中；优选地，TB1和TB2干燥在同一个容器中；优选地，所述容器是没有任何添加剂的采血管；其中TB1、TB2蛋白的氨基酸序列如序列号No.1和No.2所示。优选地，该试剂盒用于检测潜伏性结核杆菌感染。试剂盒中的伽马干扰素用作检测时的标准品。