[发明专利]一种真空冷冻干燥制备嗜酸乳杆菌菌粉的方法

权利要求书

1.一种真空冷冻干燥制备嗜酸乳杆菌菌粉的方法，其特征在于：将嗜酸乳杆菌于MRS培养基中培养，然后离心收集菌体后，用生理盐水清洗菌体，离心弃去上清液，接着，用保护剂I将菌体配制成8±1×10¹⁰cfu/mL菌悬液后，静置30-40min，再加入保护剂II，均匀混合，其中，所述保护剂II与保护剂I的体积比为(1-2)∶(2-1)，然后，静置20-30min后装于冻干管中进行冷冻干燥，所述保护剂I的配方为海藻糖10-20g/L，甘油10-20mL/L，牛血清蛋白5-15g/L，氯化钠6.5-8.5g/L，蔗糖60-100g/L，所述保护剂II的配方为：脱脂奶粉150-250g/L，葡萄糖10-40g/L，氯化钠6.5-8.5g/L，抗坏血酸0.2-0.3g/L。

2.如权利要求1所述的真空冷冻干燥制备嗜酸乳杆菌菌粉的方法，其特征在于：所述保护剂I的配方为：海藻糖10-15g/L，甘油10-15mL/L，牛血清蛋白5-10g/L，氯化钠6.5-7.5g/L，蔗糖60-80g/L。

3.如权利要求1所述的真空冷冻干燥制备嗜酸乳杆菌菌粉的方法，其特征在于：所述保护剂I的配方为：海藻糖15-20g/L，甘油15-20mL/L，牛血清蛋白10-15g/L，氯化钠7.5-8.5g/L，蔗糖80-100g/L。

4.如权利要求1所述的真空冷冻干燥制备嗜酸乳杆菌菌粉的方法，其特征在于：所述保护剂II的配方为：脱脂奶粉150-200g/L，葡萄糖10-30g/L，氯化钠6.5-7.5g/L，抗坏血酸0.2-0.25g/L。

5.如权利要求1所述的真空冷冻干燥制备嗜酸乳杆菌菌粉的方法，其特征在于：所述保护剂II的配方为：脱脂奶粉200-250g/L，葡萄糖30-40g/L，氯化钠7.5-8.5g/L，抗坏血酸0.25-0.3g/L。

6.如权利要求1所述的真空冷冻干燥制备嗜酸乳杆菌菌粉的方法，其特征在于：所述冷冻干燥时，首先于-35～-40℃下预冻24h，然后移转入真空冷冻干燥机中，于温度为-56℃，真空度为4-6Pa的条件下冻干24h。

7.如权利要求1所述的真空冷冻干燥制备嗜酸乳杆菌菌粉的方法，其特征在于：所述保护剂I与保护剂II的体积比为1∶1。

8.如权利要求1所述的真空冷冻干燥制备嗜酸乳杆菌菌粉的方法，其特征在于：所述保护剂I与保护剂II的体积比为1∶2。

9.如权利要求1所述的真空冷冻干燥制备嗜酸乳杆菌菌粉的方法，其特征在于：所述培养基中进一步添加有微孔滤膜除菌的复合抗冷冻因子。

10.如权利要求9所述的真空冷冻干燥制备嗜酸乳杆菌菌粉的方法，其特征在于：所述复合抗冷冻因子的配方为：肌醇0.1-0.2g/L、氯化钠3-4g/L、牛血清蛋白0-0.07g/L、丙氨酸0.03-0.06g/L。