[发明专利]转基因玉米安全性评价方法

权利要求书

1.转基因玉米安全性评价方法，其特征在于它包括如下步骤：

(1)、提供人淋巴细胞、待测转基因玉米的全蛋白、非转基因玉米全蛋白、阳性诱变剂；

(2)、对人淋巴细胞分成各组进行孵育：

对人淋巴细胞与待测转基因玉米全蛋白共同孵育，

对人淋巴细胞与非转基因玉米全蛋白共同孵育，

对人淋巴细胞与所述阳性诱变剂共同孵育，

对人淋巴细胞与空白剂共同孵育；

(3)、分别检测与待测转基因玉米全蛋白共同孵育的人淋巴细胞、与非转基因玉米全蛋白共同孵育的人淋巴细胞、与所述阳性诱变剂共同孵育的人淋巴细胞、与空白剂共同孵育的人淋巴细胞的细胞损伤程度及遗传损伤程度，根据人淋巴细胞的细胞损伤程度及遗传损伤程度判别所述待测转基因玉米的安全性。

2.如权利要求1所述的转基因玉米安全性评价方法，其特征在于检测人淋巴细胞的细胞损伤程度的方法为CCK-8试验和中性红试验，检测人淋巴细胞的遗传损伤程度的方法为彗星试验和微核试验。

3.如权利要求2所述的转基因玉米安全性评价方法，其特征在于所述阳性诱变剂选取阿霉素、长春新碱两种；

在步骤(2)对人淋巴细胞与所述阳性诱变剂共同孵育中，对人淋巴细胞分成以下2组进行孵育：

对人淋巴细胞与与阿霉素共同孵育和对人淋巴细胞与与长春新碱共同孵育；

在步骤(3)中，与长春新碱共同孵育的人淋巴细胞用于CCK-8试验、中性红摄取试验和微核试验的阳性对照，与阿霉素共同孵育的人淋巴细胞用于彗星试验的阳性对照。

4.如权利要求1所述的转基因玉米安全性评价方法，其特征在于待测转基因玉米全蛋白的孵育终浓度为200、100、50、25、12.5μg/ml，并各分别孵育1.5h、6h、24h；非转基因玉米全蛋白的孵育终浓度为200、100、50、25、12.5μg/ml，并各分别1.5h、6h、24h。

5.如权利要求1、2、3或4所述的转基因玉米安全性评价方法，其特征在于在步骤(3)中采用以下方法判定：

如与所述阳性诱变剂共同孵育的人淋巴细胞和与空白剂共同孵育的人淋巴细胞的细胞损伤程度及遗传损伤程度无显著差异，说明所选取试验方法不能有效检测阳性诱变剂引起的细胞毒性及遗传毒性损伤，则不进行与待测转基因玉米全蛋白共同孵育的人淋巴细胞和与非转基因玉米全蛋白共同孵育的人淋巴细胞细胞损伤程度及遗传损伤程度对比；

如与所述阳性诱变剂共同孵育的人淋巴细胞和与空白剂共同孵育的人淋巴细胞的细胞损伤程度有显著差异，再比较与待测转基因玉米全蛋白共同孵育的人淋巴细胞和与非转基因玉米全蛋白共同孵育的人淋巴细胞细胞损伤程度，如无显著差异，则判定待测转基因玉米与非转基因玉米的细胞毒性相似，可安全食用；如细胞损伤程度存在显著差异，则认为待测转基因玉米较非转基因玉米更具有细胞毒性，食用存在不安全性；

如与所述阳性诱变剂共同孵育的人淋巴细胞和与空白剂共同孵育的人淋巴细胞的遗传损伤程度有显著差异，再比较与待测转基因玉米全蛋白共同孵育的人淋巴细胞和与非转基因玉米全蛋白共同孵育的人淋巴细胞遗传损伤程度，如无显著差异，则判定待测转基因玉米与非转基因玉米的遗传毒性相似，可安全食用；如遗传损伤程度存在显著差异，则认为待测转基因玉米较非转基因玉米更具有遗传毒性，食用存在不安全性。