[发明专利]一种检测流感病毒抗体的荧光微量细胞凝集方法

权利要求书

1.一种检测流感病毒抗体的荧光微量细胞凝集方法，其特征在于所述方法是将流感病毒血凝素基因和神经氨酸酶基因克隆后转染真核细胞，使真核细胞表面重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶蛋白，对重组表达细胞进行荧光标记，该细胞表面的重组表达的血凝素和神经氨酸酶蛋白与待测样品的流感病毒血凝素抗体和神经氨酸酶抗体结合，发生凝集反应，荧光检测分析，根据荧光面积是否增加来判定待测样品中是否存在流感病毒抗体。

2.根据权利要求1所述的检测流感病毒抗体的荧光微量细胞凝集方法，其特征在于所述重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶的真核细胞为同时共同重组表达流感病毒血凝素和神经氨酸酶，或者分别重组表达流感病毒血凝素的真核细胞与重组表达神经氨酸酶的真核细胞的混合。

3.根据权利要求1所述的检测流感病毒抗体的荧光微量细胞凝集方法，其特征在于所述重组表达为瞬时表达或稳定表达。

4.根据权利要求1所述的检测流感病毒抗体的荧光微量细胞凝集方法，其特征在于所述真核细胞表面重组表达的流感病毒血凝素和神经氨酸酶蛋白为完整全长的流感病毒血凝素和神经氨酸酶蛋白，或流感病毒血凝素蛋白和神经氨酸酶的一部分，或流感病毒血凝素和神经氨酸酶的抗原表位，或将流感病毒血凝素和神经氨酸酶蛋白全长或部分肽段中的部分氨基酸进行突变或修饰。

5.根据权利要求1所述的检测流感病毒抗体的荧光微量细胞凝集方法，其特征在于所述真核细胞表面重组表达的血凝素为甲型流感病毒的H1、H2、H3、H4、H5、H6、H7、H8、H9、H10、H11、H12、H13、H14、H15、H16亚型、乙型流感病毒或丙型流感病毒的血凝素。

6.根据权利要求1所述的检测流感病毒抗体的荧光微量细胞凝集方法，其特征在于所述真核细胞表面重组表达的神经氨酸酶蛋白为甲型流感病毒的N1、N2、N3、N4、N5、N6、N7、N8、N9亚型、乙型流感病毒或丙型流感病毒的神经氨酸酶。

7.根据权利要求1所述的检测流感病毒抗体的荧光微量细胞凝集方法，其特征在于所述流感病毒血凝素抗体和神经氨酸酶抗体为IgG、IgM、IgA、IgE、IgD中的一种或几种的混合物。

8.根据权利要求1所述的检测流感病毒抗体的荧光微量细胞凝集方法，其特征在于所述荧光标记为荧光素、荧光蛋白或其它能够发出荧光的物质。

9.根据权利要求1所述的检测流感病毒抗体的荧光微量细胞凝集方法，其特征在于所述荧光检测分析所用的设备为荧光显微镜、荧光光度计或多功能微孔板检测仪。

10.根据权利要求1～9中任意一条权利要求所述的检测流感病毒抗体的荧光微量细胞凝集方法，其特征在于所述真核细胞为酵母、哺乳动物细胞、昆虫细胞或其它真核细胞，重组表达的流感病毒血凝素位于细胞膜或细胞壁表面。