[发明专利]一种人源乳腺癌抗原及其抗体

说明书

【技术领域】

本发明涉及一种新的人源乳腺癌抗原电压门控质子通道Hv1及其抗体。Hv1在正常乳腺组织中不表达，在乳腺癌组织中大量表达。本发明提供了该人源乳腺癌抗原Hv1相应的多克隆/单克隆抗体、抗体片段及衍生物等，可以在乳腺癌的诊断、预防和治疗中得到广泛的应用。

【背景技术】

乳腺癌是一种严重影响妇女身心健康甚至危及生命的最常见的恶性肿瘤之一。据资料统计，在妇女中，乳腺癌的发病率仅次于子宫癌，占全身各种恶性肿瘤的7-10％。40-60岁之间，绝经期前后的妇女发病率较高。仅约1-2％的乳腺患者是男性。

乳腺癌是乳房腺上皮细胞在多种致癌因子作用下，发生了基因突变，致使细胞增生失控。因为癌细胞的生物行为发生了改变，而导致细胞呈现出无序、无限制的恶性增生。它的组织学表现形式是大量的幼稚化的癌细胞无限增殖和无序状地拥挤成团，挤压并侵蚀破坏周围的正常乳房组织结构。

由于乳腺癌细胞很容易脱落游离，随血液或淋巴液等播散全身，形成早期的远端转移，导致其临床治愈困难。全身重要脏器的转移如肺转移、脑转移、骨转移等都将直接威胁人的生命，因此乳腺癌是严重危及人体生命的恶性疾病。

目前，在乳腺癌的治疗上主要有以下四大类方法：1)手术治疗。手术治疗又分为不同术式，它们各有优缺点，都以根治原发癌和区域淋巴结转移为主要目的，在不影响根治原发癌的前提下，尽量减少手术破坏，争取保留功能和外形。但是，乳腺癌各术式均难免发生复发及并发症。2)放射治疗。放疗能降低局部复发和区域淋巴结复发。但是能量过高60Co的γ射线或4～6mV的x线，会造成皮肤表面剂量过低，浅层组织剂量不足。放疗在临床上又可分为单纯、术前、术后3种。但是目前医学界对放射疗法说法不一，看法不同。3)化学治疗。乳腺癌是实体瘤中应用化疗最有效的肿瘤之一。但化疗只是一种辅助治疗，对可手术患者均应首先考虑手术。4)内分泌疗法。在临床上，内分泌疗法副作用小，有效病例缓解时间长，生存质量高。但其作用机理较复杂，目前尚未十分清楚。

当然，除了以上几大类常用方法以外，还有一些其他的方法。例如，近几年发展起来的新技术，在乳腺癌部位经动脉导管灌注化疗药物，使得病灶区出现皱褶，肿块变硬，腋淋巴结缩小。

但是，无论是以上哪种方式所进行的都是治疗上的，对于目前频发的乳腺癌早期检测作用并不明显。而且这些方法并非对乳腺癌细胞具有靶向专杀的作用，也就是在杀死癌细胞的过程中会大量危害周边的正常组织及免疫细胞，导致患者自身抵抗力下降。

乳腺癌细胞存在的一些抗原性物质对于诊断乳腺癌，尤其是早期诊断乳腺癌和判断预后有极大帮助。通过制备这些抗原的相应抗体，很容易通过免疫组化的方法检测活检或手术标本是否是乳腺癌；同时也可以建立相应的酶联免疫检测法检测某些抗原在血清及其它体液中的存在和数量，从而早期诊断乳腺癌或作非侵入性诊断。同时，通过制备相应抗原的抗体还可以被用作免疫导向治疗。所以，我们可以说，由乳腺癌的抗原而制备的抗体在乳腺癌的诊断、预防、治疗、判断预后等方面均起着重要的作用。当然，这些抗体的作用强弱很大程度取决于其抗原性物质的性质。如果该抗原性物质在乳腺癌组织或细胞表面的表达的越特异，相应制备出来的抗体在免疫导向治疗过程中就越有效，越安全，制备出来的乳腺癌预防性疫苗和治疗性疫苗应用前景也越广阔。

综上所述，寻找一种特异性高、在乳腺癌中表达阳性率高、位于乳腺癌细胞表面、对人具有抗原性的乳腺癌抗原对于人乳腺癌的诊断、预防、治疗都具有十分重要的意义。

本专利工作得到了国家自然科学基金(No.30840028和No.30970579)、天津市基础科学和高新技术研究项目(No.08JCYBJC25800)及教育部博士点基金(No.200800551035)的资助，在此表示最衷心的谢意。

【发明内容】

本发明的目的之一是提供一种新的人源乳腺癌抗原Hv1(电压门控质子通道)，该抗原在乳腺癌中的表达阳性率高，在正常细胞不表达。因而所提供的抗原不仅可作为人乳腺癌主动免疫治疗或预防的靶点，也能成为各种免疫导向治疗的靶点。

本发明目的之二是提供一类抗上述人源乳腺癌抗原Hv1的抗体。

首先，本发明提供的新的人源乳腺癌抗原Hv1(电压门控质子通道)的氨基酸残基序列如序列表1所示。所述的抗原为天然抗原或者重组蛋白抗原。该抗原表达于多数人乳腺癌的癌细胞中，不表达于人正常细胞中。

该抗原可刺激人体抗人乳腺癌免疫反应，可作为抗人乳腺癌免疫导向治疗靶的抗原。