[发明专利]广西铁皮石斛HPLC指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱无效
申请号: | 201010298226.6 | 申请日: | 2010-09-30 |
公开(公告)号: | CN101979052A | 公开(公告)日: | 2011-02-23 |
发明(设计)人: | 何铁光;王爱勤;卢声仙;李杨瑞;王灿琴;唐胜;董文斌;韦柱杨;黄岛平;龚明霞;赵坤 | 申请(专利权)人: | 广西壮族自治区农业科学院蔬菜研究所 |
主分类号: | A61K36/8984 | 分类号: | A61K36/8984;G01N30/02;G01N30/36;A61P37/04;A61P39/06;A61P3/10;A61P35/00 |
代理公司: | 广西南宁公平专利事务所有限责任公司 45104 | 代理人: | 黄永校 |
地址: | 530007 广西*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 广西 铁皮 石斛 hplc 指纹 图谱 建立 方法 及其 标准 | ||
1.一种广西铁皮石斛HPLC指纹图谱的建立方法,其特征在于该建立方法包括如下步骤:
(1)供试品溶液的制备:精密称取过60目筛的铁皮石斛粉末1.0g于磨口三角瓶中,适量10%氨水润湿,加入甲醇50mL并密闭静置30min,于85℃下进行4h水浴回流提取,趁热过滤,滤液于65℃下旋转蒸发至干后,用5mL甲醇溶解并定容,后用0.45μm微孔滤膜过滤,取滤液进行色谱测定;
(2)HPLC色谱分析条件:色谱柱为4.6mm×250mm 5μm的Alltima C18,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为310nm,流速为1.2mL/min,柱温为30℃;
(3)测定:精确吸取供试品溶液20μL注入液相色谱仪,按步骤(2)的条件操作,记录60min的色谱图。
2.根据权利要求1所述的广西铁皮石斛HPLC指纹图谱的建立方法,其特征在于:所述梯度洗脱的程序设为时间梯度0、10、20、25、40、55、60min,乙腈对应的浓度梯度15%、22%、25%、27.5%、30%、30%、15%。
3.根据权利要求1所述的广西铁皮石斛HPLC指纹图谱的建立方法所得的标准指纹图谱,其特征在于:该指纹图谱共有色谱峰有13个,其保留时间分别为6.387min、7.595min、8.091min、9.104min、10.494min、11.743min、13.133min、14.418min、16.777min、25.759min、28.555min、31.284min、32.533min。
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