[发明专利]血清中甘油三酯的两步酶测定方法

权利要求书

1.一种血清中甘油三酯的两步酶测定方法，其特征在于双色原物质同在试剂I中，试剂II仅含有脂蛋白脂肪酶有效成分；其测定方法为：血清先与试剂Ⅰ于37℃温浴3～5分钟，血清中游离甘油与试剂Ⅰ的反应生成醌亚胺，加入试剂Ⅱ后于37℃温浴4～7分钟，甘油三酯水解后经反应也生成醌亚胺；仪器在500-520nm波长处检测，以试剂Ⅰ反应产生的醌亚胺为空白，由试剂Ⅱ反应产生的醌亚胺计算出甘油三酯的含量，计算公式为：

OD_TG＝OD₂-OD₁×[(SV+R₁V₁)/(SV+R₁V₁+R₂V₂)]

甘油三酯浓度＝F×OD_TG

其中OD_TG是甘油三酯产生的吸光度，OD₁是样品加入试剂Ⅰ反应后测得的吸光度，OD₂是样品加入试剂Ⅱ反应后测得的吸光度，SV是血清样品的体积，R₁V₁是试剂Ⅰ的体积，R₂V₂是试剂Ⅱ的体积，F是校正因数。

2.根据权利要求1所述的血清中甘油三酯的两步酶测定方法，其特征在于试剂Ⅰ中双色原物质一个为4-氨基安替比林，另一个选自2，4-二氯酚或苯酚的衍生物。

3.根据权利要求1所述的血清中甘油三酯的两步酶测定方法，其特征在于试剂Ⅰ每升Tris-HCl缓冲液内含Tris 0.10mmol～0.20mmol、2，4-二氯酚2.0mmol～4.0mmol、MgSO₄9mmol～15mmol、胆酸钠3.0mmol～5.5mmol、TritonX-1000.08g～0.15g、ATP 0.8mmol～2.0mmol、甘油激酶400U～800U、甘油磷酸氧化酶3000U～4200U、过氧化物酶800U～1600U、4-氨基安替比林0.8mmol～2.4mmol、Proclin-300防腐剂100μl～300μl；试剂Ⅱ每升Tris-HCl缓冲液内含Tris 0.10mmol～0.20mmol、脂蛋白脂肪酶16000U～32000U、Proclin-300防腐剂100μl～300μl。

4.根据权利要求1所述的血清中甘油三酯的两步酶测定方法，其特征在于试剂Ⅰ和试剂Ⅱ中Tris-HCl缓冲液的pH值为7.6±0.2。

5.根据权利要求1所述的血清中甘油三酯的两步酶测定方法，其特征在于测定的体积比为：样品∶试剂I∶试剂II＝1∶75～80∶25～20。