[发明专利]抗α-胞衬蛋白多肽IgA抗体测定在干燥综合征诊断中的应用

说明书

本发明涉及α-胞衬蛋白多肽作为抗原在检测干燥综合征及其它免疫疾病中的应用。

技术背景

干燥综合征(Syndrome，SS)是一种以侵及泪腺和唾液腺等外分泌腺为特征的全身性自身免疫疾病。该病最常见的临床表现为眼干、口干，并可累及肺、肾脏、淋巴系统、血管及肝脏等器官。此病无明显的地区分布差异，可发生于任何年龄，以40-60岁，特别是绝经后的女性居多，男女之比为1∶9。在我国的患病率为0.77％，在老年人群中的患病率高达4％，全国有近1000万患者。干燥综合征可分为原发性干燥综合征(Primary Sjogren’s syndrome)和继发性干燥综合征(Secondary Sjogren’s syndrome)两类。该病单独发生时，称为原发性干燥综合征；与其它诊断明确的自身免疫性疾病如类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)、系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)等合并存在时，称为继发性干燥综合征。

近年来，人们对干燥综合征的病因及发病机理进行了大量研究，但至今无突破性进展。目前在临床上尚未发现理想的血清学诊断方法，除临床症状外，主要靠唇腺活检及腮腺造影等有创检查明确诊断，由于患者的医从性差，常常延误诊断，并丧失最佳的治疗时机。因此，寻找一种敏感性强、特异性高而又简便易行的检测方法，对干燥综合征的早期诊断及治疗具有重要意义。为此，本发明人经过多年研究发现了可以用于干燥综合征早期诊断的血清学特异性抗原多肽——α-胞衬蛋白多肽(为α-胞衬蛋白的抗原表位)，该多肽可以特异性的识别干燥综合征患者血清中IgA型的特异性抗体——抗IgA型α-胞衬蛋白多肽抗体，该抗体可通过一些较为简便的免疫学检测方法(如：酶联免疫吸附法)检测出来。并且具有很高的敏感性和特异性。

发明概述

本发明的目的之一是提供能够有效检测干燥综合征的特异性抗原——α-胞衬蛋白多肽。

本发明的另一目的是提供所述的α-胞衬蛋白多肽在诊断干燥综合征中的用途。

最后，本发明提供了一种改良的ELISA方法利用所述的α-胞衬蛋白多肽作为抗原用于检测干燥综合征。

本发明所用术语“α-胞衬蛋白多肽”指具有共同序列RQKLEDSYRFXFFRDEEL(即Arg-Gln-Lys-Leu-Glu-Asp-Ser-Tyr-Arg-Phe-X-Phe-Phe-Arg-Asp-Glu-Glu-Leu)的氨基酸或多肽。X可以为Gly(甘氨酸)、Ala(丙氨酸)、Val(缬氨酸)、Leu(亮氨酸)、Ile(异亮氨酸)、Phe(苯丙氨酸)、Trp(色氨酸)、Tyr(酪氨酸)、Asp(天冬氨酸)、His(组氨酸)、Asn(天冬酰胺)、Glu(谷氨酸)、Lys(赖氨酸)、Gln(谷氨酰胺)、Met(甲硫氨酸)、Arg(精氨酸)、Ser(丝氨酸)、Thr(苏氨酸)、Cys(半胱氨酸)、Pro(脯氨酸)。

Fodrin(又称胞衬蛋白)最早在神经细胞的胞浆内被发现，主要聚集在神经细胞和淋巴细胞的浆膜下，与浆膜平行呈板状分布。它是真核细胞膜骨架的主要组成部分，类似圆柱体结构，含有α和β两个亚单位。前者的分子量为240KD，后者为235KD。α、β亚单位以边对边的形式形成异二聚体，其间以二硫键相连。这种异二聚体进一步以尾对尾的形式形成四联体，并与肌钙蛋白相连，成为膜骨架的基本结构，参与细胞的运动及维持细胞的连接和形态，可能与周围神经，脑，肾脏，肝脏及全身性自身免疫病的发生有关⁽¹⁾。