[发明专利]一种生物活性多糖种衣剂的制备方法

说明书

技术领域  本发明涉及处理作物种子的制剂，具体涉及到商业用酵母菌与多糖共同组成的种衣剂。

背景技术  种子在长成植株的过程中会受到很多病虫的危害，这些危害会严重影响到植株的生长发育及最终的产量。种子处理是最重要、最有效、最方便、最经济的植保手段之一，它能有效地防治地下害虫、霉菌等危害，目前已成为很多地区病虫害春防工作的主要内容。同浸种、拌种、闷种相比，种衣剂处理技术具有使用方便、防治成本低、保水抗旱、促进种苗品质、提高种子发芽率等优点，是一项把防病、治虫、消毒、促长融为一体的种子处理技术。

种衣剂可直接或经稀释后包覆于种子表面，形成具有一定强度和通透性的保护膜的水基悬浮制剂。用传统化学药剂种衣剂对种子进行处理达到防病虫目的，较为普遍和流行，但在连续多年的应用中，也相继出现了一些缺点和不足，如种衣剂中的杀菌剂、杀虫剂大都是在土壤中化学性质较稳定的农药，在杀死种皮周围有害病虫的同时也杀死了大量有益微生物；采用化学药剂制成的种衣剂进行包衣，可能会使土壤微生态环境平衡变得脆弱，药剂残留在土壤中还对环境造成一定的污染。

有关生物类种衣剂方面的专利不多，其中有CN1276973A的含有益微生物或次生代谢产物的生物种衣剂，CN1799361A的带有激活蛋白和腐植酸的生物种衣剂等，都有保护种子的作用。近来研究发现，酵母具有抑制有害真菌病原菌的生长等性能，并且可以通过激活植物体内的酶系来增强植物自身的抗性，效果较为明显，但目前还没有专利涉及到酵母类种衣剂。

发明内容

本发明的目的是提供一种生物活性多糖种衣剂的制备方法，方法新颖、简单，可以为种衣剂市场开拓一片新领域。

一种生物活性多糖种衣剂的制备方法，其特征在于采用了生物技术和涂膜技术，制备出含有拮抗酵母菌的生物活性多糖种衣剂。该生物活性多糖种衣剂的制备分为如下三步：

(一)酵母菌细胞悬浮液的制备：

将商业应用的酵母菌(如啤酒酵母、罗伦隐球酵母、鲁氏酵母等一种或几种)接入已经灭菌的YEPD或麦芽汁培养基中，恒温培养一段时间后，静止或离心，收集酵母细胞并用水或生理盐水洗涤得到酵母菌的菌悬液，并调整至相应浓度。

(二)多糖膜的制备：

将魔芋胶、结冷胶、海藻酸钠、卡拉胶、瓜尔豆胶、茶叶多糖或南瓜多糖等一种或几种用蒸馏水溶解后，加入增塑剂，稍加热搅拌均匀，冷却后，得到多糖膜液。

(三)生物活性多糖种衣剂的制备：

将酵母菌细胞悬浮液加入到多糖膜液中，搅拌均匀，然后将种子浸入其中，配以交联剂，即可在种子表面形成一层膜。

本发明的这种生物活性多糖种衣剂具有以下优点：(1)可广泛应用于保护种子不受霉菌侵染，提高种子自身抗性，包覆稳定，提高种子发芽率及成苗率，从而提高作物产量。(2)所用酵母不产生抗生素及其它有毒物质，无化学污染，安全性高；(2)所用多糖成膜性能优良，成本低，在自然界中可被生物降解，不会产生环境污染问题；(3)将生物技术与涂膜技术有机结合，同时具备两种方法的优点；(4)生物活性多糖膜经过交联后，不会因表面附水等因素而溶解，稳定耐用。

具体实施方式

本发明中所述的种子是指花生、玉米、大豆等种子。

实例1

1)将商业应用的啤酒酵母菌种经斜面活化后接种到装有已经灭菌的50mL YEPD培养基的250mL三角瓶中，恒温30℃下150r/min培养40h，发酵液3000r/min离心20min收集菌体，用无菌水洗涤菌体两次，再用无菌水将酵母菌制成菌悬液，菌悬液浓度调至10⁹单位(血球计数板计数法)①。

2)取魔芋胶0.5kg加入到100L蒸馏水中，搅拌均匀，再加入0.1kg增塑剂甘油，搅拌30min，得到多糖膜液②。

3)将5L酵母菌菌悬液①加入到多糖膜液②100L中，搅拌均匀，得到生物活性多糖膜液③。

4)将生物活性多糖膜液③刷于花生种子表面，风干后浸入2％交联剂CaCl₂中20min，用清水浸泡20min后晾干，制备成生物活性多糖种衣剂包衣的花生种子。

实例2

1)将商业应用的鲁氏酵母经斜面活化后接种到装有已经灭菌的50mLYEPD培养基的250mL三角瓶中，恒温30℃下150r/min培养40h，发酵液静置收集菌体，用无菌水洗涤菌体两次，再用无菌水并将酵母菌制成菌悬液，菌悬液浓度调至10¹⁰单位(血球计数板计数法)①。

2)取结冷胶1.0kg加入到100L蒸馏水中，搅拌均匀再加入0.8kg增塑剂山梨醇，搅拌30min，得到多糖膜液②。