[发明专利]一种从发酵液中提纯雷帕霉素的方法

权利要求书

1.一种从发酵液中提纯雷帕霉素的方法，其特征在于它包含如下步骤：

a.用丙酮或乙醇抽提发酵液过滤后得到的菌丝体，得到抽提液后，真空浓缩得浓缩抽提液；

b.用乙酸乙酯萃取发酵液过滤后得到的上清液，控制发酵上清液的温度为15℃～35℃和pH为5.0～7.0，分离乙酸乙酯相得萃取液，真空浓缩得浓缩萃取液；

c.将步骤a中的浓缩抽提液和步骤b中的浓缩萃取液合并得浓缩液，并加入到装有大孔树脂的床层进行吸附，用丙酮和水的混合溶液作为洗涤剂洗涤大孔树脂，控制洗涤剂的温度为15～35℃和pH为5.0～8.0，用丙酮和水的混合溶液作为洗脱剂洗脱大孔树脂，控制洗脱剂的温度为15～35℃和pH为5.0～8.0，收集洗脱液并真空浓缩，得浓缩洗脱液；

d.用乙酸乙酯萃取c得到的浓缩洗脱液，经无水硫酸钠或无水硫酸镁脱水后真空浓缩得浓缩液，上样硅胶柱进行层析分离，正庚烷和丙酮混合溶液作为洗涤剂洗涤硅胶柱，正庚烷和丙酮混合溶液作为洗脱剂洗脱硅胶柱，收集洗脱液并真空浓缩得浓缩液；

e.将步骤d得到的浓缩液溶于石油醚或乙醚中结晶，结晶过程控制温度为5～25℃、时间为1～24小时，干燥得到雷帕霉素粗品。

f.丙酮溶解雷帕霉素粗品，真空浓缩后用乙醚重结晶，结晶过程控制温度为5～10℃、时间为10～20小时，干燥得到雷帕霉素纯品。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的大孔树脂为X-5、DiaionHP20或SP825。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的步骤c洗涤剂中丙酮占混合溶液体积的30％～55％。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述的步骤c洗涤剂中丙酮占混合溶液体积的40％～50％。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的步骤c洗脱剂中丙酮占混合溶液体积的70％～85％。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述的步骤c洗脱剂中丙酮占混合溶液体积的75％～80％。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所用的硅胶粒径为200-300目。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的步骤d洗涤剂中正庚烷与丙酮的体积比为6∶1～4∶1。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的步骤d洗脱剂中正庚烷与丙酮的体积比为3∶1～1∶1。