[发明专利]一种具有抗氧化活性的四角蛤蜊蛋白多肽及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及四角蛤蜊，具体涉及四角蛤蜊蛋白质水解得到的具有抗氧化活性的多肽及其制备方法和应用。

背景技术

四角蛤蜊，又叫方形马珂蛤、白蛤或四角蛤，俗称白蚬子、泥蚬子、布鸽头，属于软体动物门，瓣鳃纲，真瓣鳃目，蛤蜊科。贝壳略呈四角形，两壳相等，侧膨胀，壳面光滑呈白色。斧足发达，无足丝，生活于浅海泥沙中，是一种常见的海生贝类软体动物，广泛分布于我国南北沿海海域。江苏沿海多滩涂，四角蛤蜊为优势贝类，已实现了大规模人工养殖，产量高达80000吨/年。四角蛤蜊是一种重要的食用经济贝类，其软体肉嫩鲜美，营养丰富，内含蛋白质，脂肪，碳水化合物，钙、铁、磷及多种维生素。四角蛤蜊不仅可以食用，还具有药用、保健价值。传统中医理论认为蛤蜊味咸、性寒、无毒，归胃、肝、膀胱经，有多种的主治功能。关于四角蛤蜊的研究主要集中于食品加工、增养殖、种属界定等方面。国内外针对四角蛤蜊的开发应用多见以软体为原料加工罐头、调味品、饲料添加剂等，而以药效功能为目标的四角蛤蜊的医药、保健品研究开发较少。四角蛤蜊活性物质研究多集中在小分子化学成分(如牛磺酸和EPA)，对其生物活性大分子物质，诸如蛋白质和多糖的研究报道较少。

生物体内正常有氧代谢过程中会形成许多活性氧物质，包括超氧阴离子自由基、羟基自由基、脂氧自由基、过氧化氢等；另外，生物体也可经过传染、离子辐射、空气污染等外源性侵入而产生活性氧。体内活性氧自由基具有一定的功能，如免疫和信号传导过程。但过多的活性氧自由基就会有破坏行为，具有未成对电子的自由基可以引发细胞膜上的不饱和脂肪酸脂质过氧化反应并与膜上的酵素结合，导致细胞膜的完整性被破坏，改变结构以及通透性；另外，自由基同样可以和细胞内的蛋白质反应导致蛋白质变性，进而使细胞内正常功能无法进行，并且自由基还会攻击DNA分子，造成基因突变。大量研究已经证明，老化以及老化相关的疾病如癌症、心血管、自身免疫性疾病以及关节炎等的发生机理与体内自由基产生过多或清除自由基能力下降有着密切的关系。因此充分利用四角蛤蜊资源，将作为主要成分的四角蛤蜊蛋白质，利用酶解工艺对其进行加工，然后制成具有抗氧化功能活性且易于人体吸收的蛋白多肽具有重要意义。

发明内容：

发明目的：本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种抗氧化功能好，人体易吸收的四角蛤蜊蛋白多肽，本发明另一个目的是提供该四角蛤蜊蛋白多肽的制备方法和其应用。

技术方案：为了实现以上目的，本发明所采取的技术方案为：

一种具有抗氧化活性的四角蛤蜊蛋白多肽，它是通过以下方法制备得到的：首先取四角蛤蜊软体洗净搅碎匀浆，加入相当匀浆液重量0.05％～0.5％的胰蛋白酶，在pH7.5至8.5，温度45～55℃条件下酶解反应30至90分钟，然后在90～100℃水浴灭活酶10分钟，离心，取上清液进行超滤，截留分子量为10～50kDa的超滤液，减压浓缩，喷雾干燥得四角蛤蜊蛋白多肽。

本发明提供的具有抗氧化活性的四角蛤蜊蛋白多肽的制备方法，具体包括以下步骤：

首先取四角蛤蜊软体洗净，搅碎匀浆，得匀浆液，加入相当匀浆液重量0.05％～0.5％的胰蛋白酶，在pH7.5至8.5，温度45～55℃条件下酶解反应30至90分钟，然后在90～100℃水浴灭酶10分钟，离心，取上清液进行超滤，截留分子量为10～50kDa的超滤液，超滤液减压浓缩即得四角蛤蜊蛋白多肽。

作为优选方案，以上所述的具有抗氧化活性的四角蛤蜊蛋白多肽的制备方法，所述的胰蛋白酶的加入量为四角蛤蜊匀浆液重量的0.25％～0.5％。

作为其它优选方案，以上所述的具有抗氧化活性的四角蛤蜊蛋白多肽的制备方法，其中酶解反应的pH值为8.5。

作为其它优选方案，以上所述的具有抗氧化活性的四角蛤蜊蛋白多肽的制备方法，其中酶解反应的温度为45度，酶解反应的时间为70～90分钟。

作为优选方案，所述的具有抗氧化活性的四角蛤蜊蛋白多肽的制备方法，其中酶解液离心所得上清液进行超滤，截留得到分子量为10～30kDa的超滤液，即得四角蛤蜊蛋白多肽。

为充分研究四角蛤蜊蛋白多肽的制备方法，本发明经过以下实验筛选：

一、蛋白水解酶的筛选实验

1.1实验材料

四角蛤蜊：采集于南通茅家港(江苏省海洋与水产研究所提供)。

1.2主要试剂