[发明专利]一种测定注射用益气复脉中总木脂素含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于药学领域，涉及一种中药制剂含量测定方法，具体涉及一种测定注射用益气复脉中总木脂素含量的方法。

背景技术

注射用益气复脉(冻干)是由红参、麦冬、五味子制成的用于静脉滴注的中药复方制剂，具有益气复脉，养阴生津的疗效。主要用于冠心病劳累性心绞痛气阴两虚证，症见胸痹心痛，心悸气短、倦怠懒言、头晕目眩、面色少华、舌淡、少苔或剥苔，脉细弱或结代；冠心病所致慢性左心功能不全II、III级气阴两虚证，症见心悸、气短甚则气急喘促，胸闷隐痛，时作时止，倦怠乏力，面色苍白，动则汗出，舌淡、少苔或剥苔，脉细弱或结代。

注射用益气复脉(冻干)性状：本品为浅黄色的疏松块状物；有引湿性。取1瓶内容物，加水2～3ml溶解后，为棕红色澄明液体。用法用量：静脉滴注。每日1次，每次8瓶，用250ml～500ml 5％葡萄糖注射液或生理盐水稀释后静脉滴注。每分钟约40滴。疗程2周。

木脂素是注射用益气复脉(冻干)的主要有效成分之一，具有改善心肌功能、保护肝脏等作用。现有技术在控制制剂质量时，主要集中于作为木脂素之一的五味子醇甲的含量高低，而未对作为整体发挥作用的总木脂素的含量进行测定。

因此，为了全面检测注射用益气复脉(冻干)制剂的质量，本发明采用HPLC-峰面积归一法，测定注射用益气复脉(冻干)总木脂素含量的方法。其中，所述总木脂素为：五味子醇甲、五味子醇乙、当归酰戈米辛H、当归酰戈米辛Q四种木脂素。其中，所述液相色谱法的分离机理是基于混合物中各组分对两相亲和力的差别。根据固定相的不同，液相色谱分为液固色谱、液液色谱和键合相色谱。应用最广的是以硅胶为填料的液固色谱和以微硅胶为基质的键合相色谱。根据固定相的形式，液相色谱法可以分为柱色谱法、纸色谱法及薄层色谱法。按吸附力可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱和凝胶渗透色谱。近年来，在液相柱色谱系统中加上高压液流系统，使流动相在高压下快速流动，以提高分离效果，因此出现了高效(又称高压)液相色谱法。

实验结果表明本发明的测定方法更加简便，准确，重复性好，可作为注射用益气复脉(冻干)的测定方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种测定注射用益气复脉中总木脂素含量的方法。

本发明采用HPLC-峰面积归一法测定注射用益气复脉中总木脂素含量。

本发明所述的测定方法，包括以下步骤：

1)对照品溶液：分别取五味子醇甲、五味子醇乙、当归酰戈米辛H、当归酰戈米辛Q对照品，精密称定，加甲醇制成每1mL含五味子醇甲0.0482mg、五味子醇乙0.0017mg、当归酰戈米辛H 0.0035mg、当归酰戈米辛Q 0.0011mg的混合溶液，备用；

2)供试品溶液：取注射用益气复脉1.3g，精密称定，置离心管中，加0.5mol·L^-1的氢氧化钠溶液5mL使溶解，再沿壁精密加入环己烷10mL，密塞，上下均匀颠倒4-5次，静置数秒钟，再以上法操作两次，3000rpm离心5min，分取环己烷提取液；再按上述方法提取两次，合并环己烷提取液，挥干，残渣加甲醇使溶解，转移至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，备用；

3)含量测定：精密吸取供试品溶液，对照品溶液各10-20ul，分别过0.45μm滤膜，再注入液相色谱仪，记录色谱图；

其中，所述色谱条件 色谱柱Phenomenex luna C18色谱柱；流动相：乙腈-水梯度洗脱，柱温30℃；检测波长218nm；进样量10μL；流速1mL·min^-1。

进一步优选的，所述色谱条件：

色谱柱：规格为250×4.6mm，5μm的Phenomenex luna C18色谱柱；流动相：乙腈-水梯度洗脱0-45min乙腈由40％变化至70％；柱温30℃；检测波长218nm；进样量10μL；流速1mL·min^-1。

优选的，本发明所述的测定方法，包括以下步骤：

对照品溶液，分别取五味子醇甲、五味子醇乙、当归酰戈米辛H、当归酰戈米辛Q对照品，精密称定，加甲醇制成每1mL含五味子醇甲0.0482mg、五味子醇乙0.0017mg、当归酰戈米辛H 0.0035mg、当归酰戈米辛Q 0.0011mg的混合溶液，备用；