[发明专利]一种葛根素的制备工艺

说明书

技术领域：

一种葛根素的制备工艺属于医药技术领域，该工艺采用寡聚环糊精键合型凝胶层析介质从葛根黄酮中分离制备葛根素。

背景技术：

葛根素是从豆科植物葛根中提取出来的一种有效的天然成分。葛根作为中草药，其成分复杂，含各类化合物50余种。其中葛根黄酮(puerariaisoflavone)成分较高，为10％～14％，而葛根素则是葛根黄酮中的主要化合物，其结构式如下图所示。近年来的研究表明，葛根素能使外周血管扩张，特别是扩张冠状动脉血管，达到稀释血液、改善微循环的功效；葛根素亦有广泛的β-受体阻滞作用及改善脑与外周循环的作用；对急性心肌梗塞患者异常反应的神经内分泌系统、血浆内皮素及肾素系统有重要调节作用。近几年来市场上出现了许多以葛根素和葛根黄酮为有效成分的制剂，如松龄血脉康、欣康片、葛根黄豆甙片和普乐林注射液等。

葛根素分子式结构

目前葛根素的纯化方法多为聚酰胺柱层析，在保证纯度大于97％的情况下，收率较低，仅为1％左右。此外，聚酰胺介质毒性大，不适合于药物的分离纯化。也有人使用葡聚糖凝胶层析，高速逆流色谱以及大孔吸附树脂法从葛根黄酮粗提物中纯化葛根素，这些方法的操作步骤较为繁琐，效率低。

发明内容：

本发明就是针对上述问题，提供了一种操作简便，高效无毒的葛根素的制备工艺。

为实现本发明的上述目的，本发明采用如下的技术步骤：

1.样品预处理

将葛根黄酮粗提物溶解于20％乙醇，配置成60mg/ml的样品，然后经Al₂O₃柱脱色。脱色后的样品用去离子水稀释4倍，此时样品浓度为15mg/ml，样品溶液中乙醇含量为5％。

2.制备色谱分离工艺

通过七通阀将20ml葛根黄酮样品(15mg/ml)注入制备色谱柱，采用5％～10％醋酸水溶液作为流动相，考察醋酸浓度对葛根素制备纯化的影响；分段收集葛根素组分的洗脱液。制备检测波长200～300nm，流速5～30ml/min。色谱柱用2倍柱体积50％醋酸溶液再生。

3.产品结晶

按照一定要求合并葛根素组分洗脱液，并在65℃下旋转蒸发至干，所得固体用95％的醋酸脱色后进行结晶，结晶溶剂为水。具体过程如下：1g脱色后的葛根素固体加入20ml水中，升温至90℃使固体样品溶解，形成葛根素的饱和水溶液。在30～50℃下结晶5～12h，过滤收集晶体。母液循环套用两次。结晶后的产品再采用上述相同的方法重结晶一次，即可得到葛根素产品。

具体实施方式：

本发明采用寡聚环糊精键合型凝胶层析介质从葛根黄酮中分离制备葛根素；

本发明的工艺步骤为：样品预处理，制备色谱分离工艺，产品结晶；

本发明的工艺参数为：醋酸浓度5％～10％，制备流速5～30ml/min，检测波长200～300nm；

作为一种优选方案，工艺参数为：醋酸浓度7％，制备流速10ml/min，检测波长254nm。