[发明专利]一种制备微囊藻毒素-LR的方法

权利要求书

1.一种制备微囊藻毒素-LR异构体的方法，其特征在于该异构体的制备是通过固相萃取预纯化与半制备高效液相色谱技术分离相结合的方法实现的。

2.根据权利要求1所述的微囊藻毒素异构体-LR的分离纯化方法，其特征在于它包括步骤(1)用不同浓度的乙腈溶液从蓝藻细胞中提取微囊藻毒素；步骤(2)对步骤(1)提取的微囊藻毒素粗品进行富集与初步纯化；步骤(3)使用半制备高效液相色谱对步骤(2)得到的微囊藻毒素各异构体进行分离与纯化，得到微囊藻毒素-LR。

3.根据权利要求2所述的分离纯化微囊藻毒素-LR的方法，其特征在于步骤(1)所述的提取工艺是用乙腈/水溶液作为提取溶剂，通过超声和液氮冷冻相结合从蓝藻藻浆中提取微囊藻毒素异构体的混合物。该混合物通过膜过滤，除去植物纤维等杂质。

4.根据权利要求2中步骤(2)所述的微囊藻毒素粗品富集与初步纯化的方法，其特征在于该纯化过程是通过ODS C₁₈反相固相萃取柱完成的，萃取所用流动相为乙腈/水溶液。

5.根据权利要求2中步骤(3)所述的微囊藻毒素-LR制备方法，其特征在于，制备手段为半制备高效液相色谱，色谱条件为：Kromasil C₁₈色谱柱(250*21mm，5μm)；流动相：80％(v/v)乙腈/水溶液；柱温：20～30℃；检测波长：238nm；流速：0.5mL/min。

6.根据权利要求3所述的方法，提取所用的乙腈/水溶液的浓度为50～90％(v/v)，除杂所用膜为截留分子量10000～100000MW超滤膜或0.22～1.0μm微滤膜。

7.根据权利要求4所述的固相萃取过程，用于洗脱微囊藻毒素粗品的乙腈/水溶液的浓度为60～90％(v/v)。