[发明专利]一种从纳豆中提取微生物生产纳豆的方法

权利要求书

1.一种从纳豆中提取微生物生产纳豆的方法，其特征在于用市售的纳豆来提取分离纯化纳豆芽孢杆菌进而发酵生产纳豆，确定纳豆生产的工艺参数通过以下步骤实现：一、将从市面上买来，在冰箱中冷冻的纳豆放入无菌操作台内解冻，并打开紫外线杀菌10min。在这段时间配制固体(液体)培养基并对培养基高压蒸汽灭菌，在数分钟后纳豆解冻，将定量0.1g～3g的纳豆置于25ml～100ml的生理盐水中浸提，并不时震荡。将灭菌后的培养基倒平板，待平板冷却后，用接种环(针)深入菌液中沾取菌液以平板划线法接种到平板上，放入18℃～40℃下恒温培养15h～36h。重复此操作2～4次。挑选生长优良的菌落接种到液体培养基内扩培以备用；二、将大豆与水以1∶1～1∶5的比浸泡20h，再沥去浸泡水，将沥水后的大豆放在高压蒸汽灭菌锅内在121℃下蒸煮20～35min，取出放在无菌操作台内冷却，冷却至60～90℃接入培养好的纳豆芽孢杆菌；三、把培养好的纳豆芽孢杆菌以4％的接种量接种到蒸煮的大豆中，放入恒温振荡培养箱进行培养。同时以同种方法接种纳豆芽孢杆菌到蒸煮大豆中，从而调节发酵温度在18℃～40℃，发酵时间15h～36h，和后熟时间15h～36h等工艺参数，以求最佳生产工艺。四、在最佳发酵温度、发酵时间和后熟时间的条件下接入纳豆芽孢杆菌，发酵纳豆，对此时生产出的纳豆进行感官检测，并测定此时发酵的纳豆的营养素含量与传统发酵的纳豆营养素含量进行比较，蛋白质含量为18％～25％较常规方法生产的纳豆平均提高1％。

2.根据权利要求1所述的用微生物法生产纳豆的工艺，其特征在于步骤一中将市售的0.1g～3g的纳豆放入25ml～90ml的生理盐水中浸提，不时震荡。

3.根据权利要求1所述的用微生物法生产纳豆的工艺，其特征在于步骤一中将市售的定量0.1g～3g的纳豆放入25ml～90ml的生理盐水中浸提，不时震荡，并以无菌操作法接入平板中，放入25℃～37℃下恒温培养18h～30h。重复此操作2～4次，并挑选生长优良的菌落进行接种到液体培养基内扩培以备用。

4.根据权利要求1所述的用微生物法生产纳豆的工艺，其特征在于步骤二中将大豆与水以1∶1～1∶4的比浸泡20h，再沥去浸泡水，将沥水后的大豆放在干压蒸汽灭菌锅内在121℃下蒸煮20～30min。

5.根据权利要求1所述的用微生物法生产纳豆的工艺，其特征在于步骤二中将大豆与水以1∶1～1∶4的比浸泡20h，再沥去浸泡水，将沥水后的大豆放在干压蒸汽灭菌锅内在121℃下蒸煮20～30min，放在无菌操作台内冷却至60℃～90℃接入纳豆芽孢杆菌。

6.根据权利要求1所述的用微生物法生产纳豆的工艺，其特征在于步骤三中将培养优秀的纳豆芽孢杆菌无菌操作法以4％的接种量接入到蒸煮后的大豆中，放入发酵温度30～37℃、发酵时间15h～36h、后熟时间15h～36h的情况下发酵纳豆。

7.根据权利要求1所述的用微生物法生产纳豆的工艺，其特征在于步骤三中把培养优秀的纳豆芽孢杆菌无菌操作法以4％的接种量接入到蒸煮后的大豆中，放入发酵温度30～37℃、发酵时间18h～30h、后熟时间15h～36h的情况下发酵纳豆。

8.根据权利要求1所述的用微生物法生产纳豆的工艺，其特征在于步骤三中在发酵温度为30～37℃，发酵时间为18h～30h，后熟时间为18h～30h的情况下发酵纳豆。

9.根据权利要求1所述的用微生物法生产纳豆的工艺，其特征在于步骤四中在最佳发酵温度、发酵时间和后熟时间的条件下接入纳豆芽孢杆菌，发酵纳豆，对此时生产出的纳豆进行感官检测，判断纳豆感官上与传统纳豆的异同。

10.根据权利要求1所述的用微生物法生产纳豆的工艺，其特征在于步骤四中在最佳的发酵条件下生产纳豆并测定此法发酵的纳豆的营养素含量与传统发酵纳豆的营养素含量进行比较，蛋白质含量为19％～23％较常规方法生产的纳豆平均提高1％，确定此时用的工艺参数生产的纳豆口味更好且营养更加丰富。