[发明专利]鉴别兽用黄芪多糖注射液的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种鉴别兽用黄芪多糖注射液的方法，属于兽药鉴别技术领域。

背景技术

黄芪多糖是中草药黄芪中一种重要的天然有效成分，是许多生物活性多糖中最具代表性的一个，其主要生物活性表现为增强免疫功能、抗病毒、抗肿瘤、延缓衰老及抗辐射、调节血糖等方面，其分子量小于8万级的多糖可制成静脉注射液，适用于化疗后的滋补，提高机体的免疫力，也可以在化学结构上对其进行改性使其活性增强，因而具有良好的应用前景。黄芪多糖在动物疾病预防和治疗上已得到了广泛的应用，作为中草药免疫增强剂的典型代表，具有毒副作用小、无残留等药理学功效及广泛的兽医临床应用价值。

黄芪多糖的国际及国内市场开发潜力巨大，应用前景广泛，在利益的驱使下，兽药市场上出现了一部分假冒伪劣黄芪多糖注射液，根据标准《2003年版兽药质量标准》(p174），黄芪多糖注射液中的黄芪多糖含量应当在1%，但是一些伪劣产品的黄芪多糖含量会远远低于1%，甚至不含有黄芪多糖。这些假冒的黄芪多糖注射液不但起不到应有的治疗效果，还会因延误病情而引起患病动物病情加重或死亡，造成重大的经济损失，而用户常常缺乏必要的鉴别能力，无法判断产品真伪，购买时受产品外包装和商品名称影响较大，易被经销商所左右而蒙受损失，因此有必要找到一种快速，安全，简便且易于推广的鉴别方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种简单易行的鉴别兽用黄芪多糖注射液的方法，提高鉴别效率，降低鉴别成本，适合非专业人员在非实验室环境下对兽用黄芪多糖注射液的快速鉴别。

为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：一种鉴别兽用黄芪多糖注射液的方法，向兽用黄芪多糖注射液中加入氯化钠溶液，出现白色絮状沉淀且沉淀在摇震后不溶解的即为真品，否则为假冒产品。

在加入氯化钠之前将兽用黄芪多糖注射液按照合格标准浓度稀释至最低鉴别浓度0.061，在加入氯化钠溶液后，出现白色絮状沉淀且沉淀在摇震后不溶解的即为黄芪多糖含量合格产品，否则为不合格产品。

所述氯化钠溶液的质量百分浓度不低于5%。

所述的氯化钠溶液可以用食用食盐溶液替代。

本发明采用了非常常见的氯化钠为鉴别材料，而且还可以采用食用食盐替代，随处可以找到这种材料，鉴别的成本低，而且鉴别的过程非常简单，只需要加入氯化钠溶液即可，鉴别的结果马上即可呈现，另外，鉴别的结果很好分辨，白色的非常醒目的絮状沉淀与淡黄色透明的兽用黄芪多糖注射液形成鲜明的对比，然后只需要振摇几下就可以得出鉴别结论，鉴别过程非常简单、快速，非专业人员在非实验室环境下就可实现鉴别，该鉴别方法易于推广应用。

具体实施方式

1 黄芪多糖的提取及含量测定

1.1 黄芪多糖的提取：采用水提醇沉法从200g黄芪中提取得粗多糖，加水溶解后通过三氯乙酸法和sevag法对其进行除蛋白和脱色，最后用95%的乙醇沉淀，得粗多糖。

1.2 含量测定

1.2.1 葡萄糖标准曲线的绘制：精密称取100mg葡萄糖，加水溶解后定容于100ml容量瓶中，得葡萄糖标准溶液1mg/ml。精取0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0ml，用蒸馏水分别定容于50ml容量瓶中，制备成标准溶液。采用苯酚-硫酸法在756紫外分光光度计上于490nm处比色测定吸光度(A)，以A对浓度作图得标准曲线，计算得回归方程 C = 0.0104A-0.0188，r = 0.9956。

1.2.2 样品含量测定：取黄芪多糖粗粉5mg溶解后定容于50ml容量瓶中，得1mg/ml的样品溶液，分别精取1.0ml样品溶液定容于5个50ml容量瓶中，摇匀。采用苯酚-硫酸法在756分光光度计上于490nm处比色测定吸光度值，根据回归方程计算得多糖含量。

2 黄芪多糖注射液的检测方法

配制一系列含量分别为5%、10%、15%、20%和饱和的氯化钠溶液，将提取所得的多糖样品按照常规注射液的制备流程制成多糖含量为1%的溶液作为样品，另取一支正规厂家生产的合格黄芪多糖注射液(含量为1%)作为对照品。分别量取1ml各浓度的氯化钠溶液于五支玻璃试管中，依次向各试管中滴加0.5 ml的多糖溶液，观察溶液变化；将样品和对照品分别作5倍、10倍、15倍、20倍稀释后，再取0.5ml滴加于各浓度的氯化钠溶液中，观察溶液变化，结果见表1。

表1 不同浓度的氯化钠中黄芪多糖的沉淀情况

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表1中原液多糖含量为1%，出现沉淀为阳性，用+表示；未出现沉淀则为阴性，用-表示。