[发明专利]一种烟草及烟草制品中生物碱的测定方法

权利要求书

1.一种烟草及烟草制品中生物碱的测定方法，其特征在于：利用氢氧化钠溶液将烟草或烟草制品中的生物碱游离出来，采用含有内标的三乙胺/三氯甲烷溶液萃取试样中的生物碱，通过气相色谱-质谱（GC-MS）定量分析检测其中烟碱、降烟碱、新烟碱、麦斯明和假木贼碱5种生物碱，采用内标法进行定量分析。

2.根据权利要求1所述的烟草及烟草制品中生物碱的测定方法，其特征在于：该方法包括以下具体步骤：

（1）烟草及烟草制品中生物碱的游离：称取0.3g烟草或烟草制品粉末于50mL三角锥形瓶内，加入2.0mL 质量百分比5% 的氢氧化钠溶液于三角锥形瓶中，轻摇萃取瓶，湿润试样，静置不超过25min；

（2）烟草及烟草制品中生物碱的萃取和分析：烟草生物碱游离后，然后加入20.0mL含内标物质的三乙胺/三氯甲烷萃取溶液，加盖密封后置于超声波清洗机内，超声提取，静置过夜使试样和萃取溶液分离，取2mL下层溶液经无水硫酸钠过滤后，转移到色谱分析瓶中待气相色谱－质谱进样分析； 

气相色谱－质谱分析条件：

色谱柱：DB-35MS毛细管柱，长30 m，内径0.25mm，膜厚0.25μm；载气：氦气，载气流速：1.0 mL/min；进样口温度：250℃；烟碱的检测：进样量1μl，分流进样，分流比40:1；降烟碱、麦斯明、假木贼碱和新烟碱的检测：进样量2μl，分流进样，分流比10:1；

程序升温：初温：100℃保持3min，以8℃/min速率由100℃升至260℃，保持10min，总运行时间 33min；

检测器：质谱检测器；溶剂延迟：8min；电离电压：70ev；离子源温度：230℃；传输线温度：280℃；扫描离子范围：33～400amu；质谱扫描方式：选择离子监测（SIM）。

3.根据权利要求1或2所述的烟草及烟草制品中生物碱的测定方法，其特征在于：萃取溶液三乙胺/三氯甲烷的混合比例为体积比1∶10000。

4.根据权利要求1或2所述的烟草及烟草制品中生物碱的测定方法，其特征在于：内标选择双内标即2-甲基喹啉和 2,4’- 二联吡啶，烟碱以2-甲基喹啉为内标，其它生物碱以2,4’- 二联吡啶为内标；2-甲基喹啉在萃取溶液中的浓度为0.18mg/mL, 2,4’- 二联吡啶在萃取溶液中的浓度为10μg/mL。

5.根据权利要求2所述的烟草及烟草制品中生物碱的测定方法，其特征在于：超声提取时间为15min，超声功率为40Hz。

6.根据权利要求1或2所述的烟草及烟草制品中生物碱的测定方法，其特征在于：定量分析时，标准物质的标准工作曲线的配置按照下述方法进行，单独配制烟碱的系列标准工作曲线溶液，单独配制降烟碱的系列标准工作曲线溶液，混合配制麦思明、假木贼碱和新烟碱的系列标准工作曲线溶液。