[发明专利]通过植物组织培养生产福建道地金线莲的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体是一种通过植物组织培养生产，组织培养生产福建道地金线莲的方法。

背景技术

福建道地金线莲(Fujian daodi ShorthairyAntenoron)是兰科，开唇兰属植物，是一种濒危珍惜的药用全草，是我国传统的珍贵药材。其性平味甘，具有清热、凉血、祛风利湿、强心利尿、固肾平肝以及降血压等功效，主治咯血、支气管炎、肾炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、风湿性关节炎、小儿急惊风、毒蛇咬伤等。被称为“药中之王”。由于福建道地金线莲的显著的药用功效及保健功能已为世人公认，其商品价格多年来一直不菲。

福建道地金线莲(Fujian daodi ShorthairyAntenoronO)是一种前景可喜的中药免疫增强剂，并具有抗肿瘤、降血糖、抗衰老、抗氧化、抗诱变等作用，受到国内外学者的高度重视。

由于金线莲属植物的种子不具胚乳，无发芽能力，只有在真菌共生下，才促进种子萌发生长，发芽率很低，而传统的分株扦插等无性繁殖方式的成活率很低、生长速度很慢、繁殖率低、加之其对生长条件要求严格、自然条件恶化、野生资源锐减、人为肆意采挖，现已濒临灭绝，致使药源紧缺，国内外市场供不应求。

目前国内外学者开展了对金线莲的初步研究，而通过本地选优的福建道地金线莲的培养主要集中在组培诱导、基本培养基条件的筛选和理化因子的考查等方面。还没有找到一个有效地培养技术用以解决福建道地金线莲诱导和增殖中存在的疑点和难点，从而影响了福建道地金线莲的深入研究应用。

天然的野生金线莲已作为濒临灭绝的植物物种受到保护，严禁采摘。为此研究福建道地金线莲的人工培养技术，实现产业化显得十分重要。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种保持植物体本身优良药效，繁殖速度快，增殖倍数高的的通过植物组织培养生产福建道地金线莲的方法。

本发明的目的是这样实现的：一种通过组织培养生产福建道地金线莲的方法，它包括如下步骤：

1.1植物体的选择及无菌处理：

选择6-8月份生长的野生福建道地金线莲植物体，除去根和叶进行清洗和无菌处理，将茎段剪成0.5-1.5CM带茎节的福建道地金线莲小段组织；

1.2丛生芽诱导培养：

将经过无菌处理后的福建道地金线莲小段组织在诱导培养基中进行组织诱导培养丛生芽，培养周期：10-60天，培养温度：10-35℃，光照培养时间：0-24小时/天，光照强度：100～2000lux lx；所述的诱导培养基为MS培养基+蔗糖10-50g/L+琼脂6-8g/L+活性炭2.0-3.0g/L+萘乙酸0.1-3.0mg/L+6-苄氨基腺嘌呤0.1-5.0mg/L，PH值为5.0-7.0；

1.3大规模培养：

将诱导出的丛生芽在大规模培养基中进行大规模培养，培养周期：10-60天，培养温度：10-35℃，光照培养时间：0-24小时/天，光照强度：1000～2000lux；所述的大规模培养基为：改良MS培养基+硝酸钙600mg/L+香蕉泥30-50g/L+蔗糖10-50g/L/L+琼脂6-8g/L+活性炭0.1-5.0g/L+萘乙酸0.1-3.0mg/L+6-苄氨基腺嘌呤0.1-5.0mg/L，PH值为5.0-7.0。

作为本发明通过组织培养生产福建道地金线莲的方法更优化的技术方案，对培养基的配方比例和培养条件进行优化选择。

所述的丛生芽诱导培养：培养周期：20-50天，培养温度：20-30℃，光照培养时间：0-24小时/天，光照强度：1500～2000lux；所述的诱导培养基为：MS培养基+蔗糖20-40g/L/L+琼脂6-8g/L+活性炭2.0-3.0g/L+萘乙酸1.0-2.0mg/L+6-苄氨基腺嘌呤2.0-3.0mg/L，PH值为5.5-6.5；

所述的大规模培养：培养周期：20-50天，培养温度：20-30℃，光照培养时间：8-16小时/天，光照强度：1500～2000lux；所述的大规模培养基为：改良MS培养基+硝酸钙600mg/L+香蕉泥30-50g/L+蔗糖20-40g/L+琼脂6-8g/L+活性炭2.0-3.0g/L+萘乙酸1.0-2.0mg/L+6-苄氨基腺嘌呤2.0-3.0mg/L，PH值为5.5-6.5。

植物体的无菌处理是本发明的重要技术环节，无菌处理的方法包括如下步骤：

A、将选取的福建道地金线莲植株，用自来水冲洗2-3小时，用毛刷清洗干净，除去根和叶，再用蒸馏水冲洗，置超净工作台内。