[发明专利]一种海洋好氧反硝化盐单胞菌菌株HGMN422及其应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及的是一种海洋好氧反硝化盐单胞菌(Halomonas sp.)菌株及其在处理受无机氮污染海水中的应用。

背景技术

近年来，在海水网箱养殖产业飞速发展的同时，网箱养殖“自身污染”问题日益凸现出来，不但对邻近海域生态环境造成了严重负面影响，反过来又制约了海水养殖生产本身。海水网箱养殖系统作为一种高密度、高投饵的人工养殖生态系统，其输出的废物，残饵、代谢及排泄废物等是引发环境问题的主要污染源，最后导致养殖区海水富营养化，为赤潮的发生提供了物质基础，成为赤潮发生的诱因。近年来我国近岸海域赤潮发生的频率、波及范围和危害程度呈逐年上升趋势，其中有害赤潮的爆发对环境、经济和人体健康造成的影响尤为严重。调查发现，大部分富营养化海水中氮、磷含量十分丰富，尤其以无机氮污染最为严重，其中近岸海域中无机氮超II类海水水质标准的海域占52％。网箱养殖与水域生态环境的矛盾的日趋突出，养殖对水域环境的要求使得对海水网箱养殖环境修复的研究极其迫切。

近年来国内外对氮污染的治理日益重视，当前已经有许多物理化学方法可以实现污染水体中硝酸盐的去除。譬如，离子交换，反渗透和电渗析等都是很有效的处理技术。但是利用这些工艺的主要缺点就是成本昂贵，而且如何处理由这些工艺本身产生的高浓度的硝酸盐废水也是一个问题。利用生物反硝化方法去除硝酸盐氮是脱除氮素污染的一种经济有效的方法。为达到对海水网箱养殖环境中无机氮污染的快速、高效去除，本发明从网箱养殖沉积环境中分离纯化获得一株微生物，并用于对无机氮污染的有效治理。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供一种海洋好氧反硝化盐单胞菌菌株，该菌株在好氧条件下具有高效反硝化能力，能快速有效的去除无机氮污染海水中的亚硝酸盐氮(NO₂^--N)及硝酸盐氮(NO₃^--N)，成本低且环保。

本发明的第二个目的在于提供上述海洋好氧反硝化盐单胞菌菌株在处理受无机氮污染海水中的应用。

本发明的第一个目的是通过如下技术方案来实现的：一种海洋好氧反硝化盐单胞菌菌株，该菌株属于盐单胞菌属(Halomonas sp.)，保藏名称：盐单胞菌HGMN422，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，地址：湖北省武汉市武昌珞珈山武汉大学保藏中心，保藏日期：2009年8月28日，保藏号：CCTCC NO：M209186。

优选的，所述海洋好氧反硝化盐单胞菌菌株的筛选分离鉴定过程为：取海水鱼类网箱养殖场区的沉积物，在实验室利用富集基和选择培养基培养后，并分离纯化菌株，根据菌株对亚硝酸盐氮(NO₂^--N)及硝酸盐氮(NO₃^--N)还原能力的强弱，筛选出对无机氮好氧反硝化能力强的菌株，并最终筛选出一株对亚硝酸盐氮(NO₂^--N)及硝酸盐氮(NO₃^--N)还原能力强的菌株，编号为HGMN422，然后根据菌株的菌落形态特征、培养特征和生理生化特征，及其16SrDNA基因序列经与Genbank中已登陆的基因序列进行对比分析发现，菌株HGMN422经鉴定为盐单胞菌属，命名为盐单胞菌(Halomonas sp.)HGMN422。

本发明的第二个目的是上述海洋好氧反硝化盐单胞菌菌株在处理受无机氮污染海水中的应用。

在处理受无机氮污染海水中的具体过程为：取经上述分离纯化的盐单胞菌(Halomonas sp.)HGMN422单菌落，于活化培养基中培养20-24h，按海水与菌液体积比为40-60∶1，将盐单胞菌(Halomonas sp.)HGMN422接种于含高浓度亚硝酸盐氮(NO₂^--N)和硝酸盐氮(NO₃^--N)的海水中，pH范围7.6-8.2，20-28℃恒温振荡培养3-9d。

上述活化扩大培养中培养基的组成优选为：葡萄糖10g，柠檬酸钠5g，醋酸钠1.5g，氯化铵1.0g，硝酸钾1.0g，磷酸氢二钠0.6g，磷酸二氢钾0.4g，硫酸镁0.1g，氯化亚铁0.1g，酵母膏0.5g，陈海水1000mL，pH 7.6-8.2，121℃灭菌20min。