[发明专利]大型真菌试管种培养基的制备方法

说明书

技术领域：

本发明涉及微生物，具体涉及微生物中大型真菌的培养基。

背景技术：

目前，大型真菌的试管种培养基主要分为固体物培养基，半固体形培养基，这两种培养基各有长处，但两者都存在着难以克服的缺陷。

固体培养基营养成份低，制作费工费时，转接原种萌发慢，发菌势弱，谷粒、麦粒、稻谷培养基易污染、易老化、转接培养袋后易招致虫、鼠害。

半固形培养基的缺陷是易老化，降低菌丝活力，生产优势衰退，在常温下，往往需要多次转管，因此又容易导致失纯及再度退化。

随着液体菌种的推广，用上述试管种的菌胎转接液体种，都存在着浮力差、萌发慢且弱，因而污染率高。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种大型真菌试管种培养基的制备方法。，克服现有技术存在的培养基营养成份低、菌种萌发慢、易老化、污染率高，需多次反复扩转，生产成本高、生产效率低的缺陷。

本发明通过以下技术方案实现：

大型真菌试管种培养基，由营养液润湿草籽制成，草籽与营养液重量比为1∶0.6～1.5。应使草籽表面全部湿润营养液、并附着营养液为佳。

所述营养液为豆芽、麦皮、菇，经破碎、热水浸提、浓缩制得，重量百分比为豆芽40％，麦皮20％，菇40％；三种物质与水重量比为1∶1.5。

所述的菇为鲜菇，为鲜菇中的平菇、草菇、蘑菇、猴头菇的一种或几种混合。可根据当地的情况，选用较经济的鲜菇。上述的鲜菇根、须、茎等均可作营养液的原料。

所述豆芽为大豆芽、绿豆芽、碗豆芽、蚕豆芽一种或几种混合。从营养价值的角度，以大豆芽为佳。

大型真菌试管种培养基的制备方法，包括下列步骤：

(1)采集看麦娘或狗尾草籽，去除杂质后放入水中浸泡40小时，然后取出草籽，晾干表皮水份备用；

(2)制备营养液：按所述的重量百分比，以及总物质与水体积比，将豆芽、麦皮、菇放入水中煮沸，保温25分钟，然后过滤取出液体，再将液体加热浓缩，直至用玻璃棒插入浓缩液中，再提起玻璃棒，有挂棒现象为止；

(3)向步骤(2)得到的营养液中加入磷酸二氢钾，调整PH至6.5-7.2；

(4)用步骤(3)得到的营养液喷洒步骤(1)得到的草籽，并充分拌和均匀，使草籽表面全部湿润营养液、并附着营养液，即得到所述的培养基；

(5)装管、灭菌：将步骤(4)得到的培养基装入试管中，塞棉塞、包扎，装入高压锅中，保持1.5个大气压，灭菌60分钟，自然冷却至70度，开启高于锅盖取出试管，当试管温度降到25℃左右，在无菌操作条件下，接入基础菌种；

(6)将步骤(5)得到的试管菌种在25℃左右培养10-13天就可用于生产。

本发明的优点：

一、本发明的培养基碳：氮比合理，营养充分，菌丝长速快，且菌丝洁白有力。

二、本发明的培养基在常温下存放一年，活力如故，转接试管种或原种，仍表现出萌发快、发菌有力、无污染的特点。

三、本发明的试管种可直接转接产菇袋(省掉扩转原种、裁培种工序)，可以缩短裁培周期70天左右。有利于抓季节，抢早上市，提高效益。

如果用本发明的试管种转接原种或裁培种，一支试管种可转接原种或裁培种200瓶(袋)左右，是常规试管种的30-50倍。

具体实施方式：

(1)取狗尾草草籽100斤，去除杂质后放入水中浸泡55小时，然后取出草籽，晾干表皮水份备用；

(2)制备营养液：取大豆芽40％、麦皮20％、鲜菇中的平菇40％放入水中煮沸(按三种物质与水重量比为1∶1.5)，保温40分钟，然后过滤取出液体，再将液体加热浓缩，直至用玻璃棒插入浓缩液中，再提起玻璃棒，有挂棒现象为止；

(3)向步骤(2)得到的营养液中加入磷酸二氢钾，调整PH至7；

(4)用步骤(3)得到的营养液喷洒步骤(1)得到的草籽(草籽与营养液的重量比为1∶0.3)，并充分拌和均匀，使草籽表面全部湿润营养液、并附着营养液，即得到所述的培养基；

(5)装管、灭菌：将步骤(4)得到的培养基装入试管中，塞棉塞、包扎，装入高压锅中，保持1.5个大气压灭菌60分钟，自然冷却至70度，开启高于锅盖取出试管，当试管温度降到25℃左右，在无菌操作条件下，接入基础菌种；

(6)将步骤(5)得到的试管菌种在25℃左右培养10-13天就可用于生产。