[发明专利]用于检测人乳头瘤病毒的试剂

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于检测人乳头瘤病毒的试剂。

背景技术

国际癌症研究组织(IARC)调查显示宫颈癌是妇女当中第三大常见的恶性肿瘤，在中国每年约有8万的新发病例和3万的死亡病例。研究表明，人乳头瘤病毒与宫颈癌的发生密切相关，99％以上的宫颈癌患者当中可检测出HPV的感染。到目前为止已发现了100多个型别的HPV，其中感染生殖道的有40多个(de Villiers EM，Fauquet C，Broker TR，Bernard HU，zur Hausen H.Classification of papillomaviruses.Virology.2004.324：17-27.)。根据流行病学调查以及分子进化树分析，HPV可分为高危型和低危型，其中高危型HPV包括15种(HPV-16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68，73，82)，低危型HPV包括12种(HPV-6，11，40，42，43，44，54，61，70，72，81，CP6108)(Munoz N，BoxchFX，de Sanjose S，Herrero R，Castellsague KV，Shanh，Snijders PJ，Meijer CJ.Epidemiologic classification of human papillomavirus types associated with cervical cancer.N.Engl.J.Med.2003.348：518-527.)。在宫颈癌患者当中，HPV 16的感染最多，其次是HPV 18，而在中国HPV 58和52这两个型别的感染率相对较高(Clifford GM，GallusS，Herrero R，Munoz N，Snijders PJ，Vaccarella S，Anh PT，Ferreccio C，Hieu，MatosE，Molano M，Rajkumar R，Ronco G，de Sanjose S，Shin HR，Sukvirach S，Thomas JO，Tunsakul S，Meijer CJ，Franceschi S，and the IARC HPV Prevalence Surveys Study Group.Worldwide distribution of human papillomavirus types in cytologically normal women in the International Agency for Research on Cancer HPV prevalence surveys：a pooled analysis.Lancet.2005.366：991-998.)。

现在最常用的HPV分子检测方法有：

(i)信号放大法，如美国食品和药物管理局(FDA)通过的第二代杂交捕获技术(HC2)和Cervista HPV HR。HC2是现在临床上用的最多的一种检测方法，它采用两组特异的RNA探针与HPV DNA杂交，利用抗体捕获RNA：DNA杂交子并通过结合二抗使杂交信号放大的方法来检测13种高危型HPV和5种低危型HPV。杂交捕获法敏感性较好，重复性高，缺点是不能测定具体的HPV型别，同时也存在着高危型HPV探针与一些低危型HPV发生交叉反应，从而降低了特异性。另外，这种检测成本太高，并不能作为一种筛查方法在发展中国家得以推广。Cervista HPV HR通过荧光共振能量转移(FRET)的方法使检测信号放大，同样也不能对HPV进行分型并存在交叉反应。