[发明专利]一种显微受精用移卵针的制备方法及其制备的移卵针

说明书

技术领域

本发明涉及一种显微受精用操作工具，尤其涉及一种显微受精用移卵针的制备方法及其制备的移卵针。

背景技术

在目前，显微操作系统已广泛应用于生物工程领域，而在实验过程中制作出符合要求的显微操作针对于实验的正确操作尤其重要。

显微操作工具尤其是移卵针的质量是影响胚胎质量的重要因素。选择合适的移卵针，可将胚胎的损伤降到最低限度。避免对卵子造成损伤。

因此，有必要提供一种简单易行且质量稳定的移卵针的制备方法，以制备耐用、高质量的移卵针。

发明内容

本发明的目的在于提供一种显微受精用移卵针的制备方法，其主要包含步骤：

1)将玻璃管在清洁液中浸泡，取出后用自来水反复冲洗；

2)用Milli-Q水浸洗，放入烘箱，56℃～60℃烘干；

3)将烘干的玻璃管在加热灯上加热，当加热部分颜色发红并变得很柔软后，移出火焰并向两端牵拉，拉制成为的微管；

4)将步骤3)制备的微管在合适的部位断开，并将断口在加热灯上烧平滑，制得所述移卵针。

所述的方法，步骤1)所述玻璃管的直径为0.25～0.35cm。所述清洁液含有重铬酸钾63g、浓硫酸1000ml、蒸馏水200ml。

所述的方法，步骤1)中，将玻璃管在清洁液中浸泡24小时。

本发明还提供根据上述方法制备的移卵针。其孔径为

本发明提供的显微受精用移卵针的制备方法简单、成本低且制备的该移卵针质量稳定。

为让本发明的上述和其它目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例，作详细说明如下。

具体实施方式

取直径为0.25～0.35cm将玻璃管在清洁液中浸泡24小时，清洁液含有重铬酸钾63g、浓硫酸1000ml、蒸馏水200ml，取出后用自来水反复冲洗；然后用Milli-Q水浸洗，放入烘箱，56℃～60℃烘干；烘干后，取出放入干净的锥形瓶中，用锡箔纸盖上，避免落入灰尘。

将烘干的玻璃管在加热灯上加热，当加热部分颜色发红并变得很柔软后，移出火焰并迅速向两端牵拉，拉制成为的微管。

根据实际操作的需要，将制备的微管在合适的部位断开，并将断口在加热灯上烧平滑，管口光滑平整以减轻插入输卵管时对输卵管的损伤，同时必须注意移卵管头在火焰上时间不可太长，防止融化堵塞。管口要平且钝化。

根据上述方法制备的显微受精用移卵针，其孔径为

在显微注射前，可以应用移卵针移动卵母细胞，将5-10枚卵母细胞移入操作液滴中，然后用注射针抓取一个精子放入液滴中，用针尖在精子尾部迅速划过进行制动，随后从尾部吸入注射针内。

在用移卵针将注射后受精卵转移到假孕母体内时，从孵箱中取出受精卵，用移卵针吸出受精卵并用M2溶液洗涤2-3次，调整实验用量，将其置于凹玻片的M2溶液中，调焦使在低倍镜下清楚地看到受精卵的轮廓，并且保证受精卵有足够空间自由移动，用持卵器将卵汇聚到一起，移卵时注意不要将气泡移入，影响操作视野。

在对卵母细胞进行冷冻处理时，也可以应用本发明的移卵针来移动卵母细胞：用吸管按顺序吸入0.5mol蔗糖溶液(5.5cm)→空气(1.5cm)→玻璃化溶液(0.5cm)→空气(0.5cm)→玻璃化溶液(1.5cm)，平行放置于操作台上，将卵母细胞用移卵针移入玻璃化溶液中洗一次，然后将10枚卵母细胞置于细管中的玻璃化溶液中，卵母细胞导入后依次再吸入空气(0.5cm)→玻璃化溶液(0.5cm)→空气(0.5cm)，最后吸0.5mol蔗糖溶液(1cm)。用封口机将塑料细管封口。将含有卵母细胞的细管一端直接投入液氮，另一半用液氮气熏蒸冷冻，待蔗糖部分冻结后转入液氮罐中长期保存。

应用该移卵针时，还能插入输卵管壶腹部靠进伞部开口的弯曲部位，吹入含有胚胎的操作液，大幅缩短了操作周期，且对输卵管的损伤小。

本发明提供的显微受精用移卵针的制备方法简单、成本低且制备的该移卵针质量稳定。

虽然本发明已以较佳实施例披露如上，然其并非用以限定本发明，任何所属技术领域的技术人员，在不脱离本发明的精神和范围内，当可作些许的更动与改进，因此本发明的保护范围当视权利要求所界定者为准。