[发明专利]野生茄子耐盐基因StNHX1及其抗除草剂植物表达载体

权利要求书

1.野生茄子耐盐基因StNHX1，其特征在于该基因的序列为SEQ ID NO.1。

2.野生茄子耐盐基因StNHX1抗除草剂植物表达载体，其特征在于由权利要求1所述的野生茄子耐盐基因StNHX1与抗除草剂植物表达载体构成。

3.根据权利要求2所述的野生茄子耐盐基因StNHX1抗除草剂植物表达载体，其特征在于所述的抗除草剂植物表达载体为分别用Hind III/EcoR I双酶切质粒pBI121和pCAMBIA3301，回收pBI121中的3005bp的小片段与pCAMBIA3301中的11251bp的大片段，连接所述的两个片段得到的中间载体pCAMBIA3301-121。

4.权利要求3所述的野生茄子耐盐基因SNHX1抗除草剂植物表达载体的构建方法，其特征在于包括如下步骤：

1)野生茄子‘Torvum Vigor’耐盐基因StNHX1的克隆

选用野生茄子‘Torvum Vigor’作为试验材料，取叶片，提取总RNA，反转录得到cDNA，用RNase消化cDNA产物，根据NCBI上公布的番茄耐盐基因NHX1序列信息设计特异引物，在合成的野生茄子叶片cDNA中扩增StNHX1，PCR产物纯化后连接到pMD19-T载体上，命名为pMD19-StNHX1，BamH I/SacI双酶切、测序验证；

2)中间载体pCAMBIA3301-121的构建

pBI121和pCAMBIA3301分别Hind III/EcoR I双酶切，回收pBI121中3005bp的小片段和pCAMBIA3301中11251bp的大片段，T₄DNA连接酶连接，连接产物转化DH5α感受态细胞，质粒经提取纯化后，Hind III/EcoR I双酶切验证，得到构建成功的中间载体pCAMBIA3301-121；

3)StNHX1植物表达载体pCAMBIA3301-StNHX1的构建

pMD19-StNHX1与中间载体pCAMBIA3301-121分别BamH I/Sac I双酶切，回收pMD19-StNHX1中1605bp的小片段与pCAMBIA3301-121中12445bp的大片段，用T₄DNA连接酶连接，连接产物转化DH5α感受态细胞，质粒经提取纯化后，分别BamH I/Sac I双酶切、Hind III/EcoR I双酶切、Xho I单酶切验证，得到构建成功的植物表达载体pCAMBIA3301-StNHX1。