[发明专利]一种固定化纤维素酶的制备方法

权利要求书

1.一种固定化纤维素酶的制备方法，其特征在于：固定化纤维素酶的制备方法按以下步骤实现：一、称取2.0-4.0g脱乙酰度为90％的壳聚糖，0.6-0.8gPEG6000溶于100ml 2％的乙酸溶液中，于35-45℃共混1.5-2.5h；二、用注射器将共混溶液注入2％三聚磷酸钠溶液中，静止2.5-3.5h；三、过滤洗涤得中性球状的壳聚糖-聚乙二醇载体；四、称取9-11g载体，加入100ml 5％戊二醛溶液，45-55℃活化5.5-6.5h；五、过滤后用丙酮和蒸馏水洗至中性；六、称取1.5-2.5g活化后的载体，加入20ml纤维素美容液与17-19℃进行固定化反应15-17h；七、过滤后冲洗固定化酶数次，即得固定化纤维素酶。

2.根据权利要求1所述的一种固定化纤维素酶的制备方法，其特征在于步骤一中准确称取3.0g脱乙酰度为90％的壳聚糖，0.75gPEG6000溶于100ml2％的乙酸溶液中，于40℃共混2h。

3.根据权利要求1所述的一种固定化纤维素酶的制备方法，其特征在于步骤二中采用pH＝8.2的2％三聚磷酸钠溶液。

4.根据权利要求1所述的一种固定化纤维素酶的制备方法，其特征在于步骤二中用6号注射器将共混液注入2％三聚磷酸钠溶液中，静止3h。

5.根据权利要求1所述的一种固定化纤维素酶的制备方法，其特征在于步骤三中过滤后用蒸馏水洗涤出去多余的三聚磷酸钠。

6.根据权利要求1所述的一种固定化纤维素酶的制备方法，其特征在于步骤四中采用pH＝10.0的戊二醛溶液。

7.根据权利要求1所述的一种固定化纤维素酶的制备方法，其特征在于步骤四中称取10g载体，加入100ml5％戊二醛溶液，50℃活化6h。

8.根据权利要求1所述的一种固定化纤维素酶的制备方法，其特征在于步骤六中称取2.0g活化后的载体，加入20ml纤维素酶于18℃进行固定化反应16h。

9.根据权利要求1所述的一种固定化纤维素酶的制备方法，其特征在于步骤七中过滤后用乙酸-乙酸钠缓冲液冲洗固定化酶数次。