[发明专利]芦苇湿地石油降解菌固定化载体对地表水体的净化方法

说明书

技术领域

本发明属于对石油污染水体的处理领域，特别涉及芦苇湿地石油降解菌固定化载体对地表水体的净化方法。

背景技术

鉴于我国一半左右的油田都位于河口地区的实际情况，河口地区河流普遍存在不同程度的石油污染，影响到河口地区人们的生产和生活。当前净化石油污染地表水体的方法主要是通过接种特定的石油降解菌、添加营养物或表面活性剂、提供电子受体和共代谢底物及优化处理条件等实现对石油污染物的降解。但该方法对净化过程很难控制，净化效果不稳定，且由于要添加营养物等外源物质而导致净化费用较高。鉴于该方法的缺点及河口地区普遍存在的大型芦苇湿地的实际(如合理加以利用既可以净化水体又可以节约人力物力)，申请人已有的“以芦苇地表根须为载体的石油降解菌固定化方法”(申请号200910255830.8)，只是增加芦苇湿地地表附着的石油降解菌的量，以提高湿地对石油污染物的净化能力，但该方法只限于对石油降解菌的分离、驯化、培养以及小范围芦苇地表根须的固定化方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种芦苇湿地石油降解菌固定化载体对地表水体的净化方法，以弥补现有技术的不足。

本发明是在以芦苇地表根须为载体的石油降解菌固定化方法(申请号：200910255830.8)的基础上，结合实地应用时需大范围固定化的实际，取已驯化、培养的石油降解菌，配制成菌浊液并加入海藻酸钠，混合均匀后用喷壶均匀地喷洒到芦苇湿地的芦苇地表根须载体上进行菌种的附着固定化；然后以实际石油污染河流做为湿地进水水源，以地表漫流的方式流过待处理的芦苇湿地表面，同时通过进水流量控制，获得石油类污染物的最佳去除效果。

本发明的具体方法包括如下步骤：

首先选择待处理的芦苇湿地，然后利用湿地芦苇地表根须制成石油降解菌固定化载体，以实地石油污染河流做为湿地进水水源，再按照单位地表面积不大于0.0075m³/小时的进水流量以地表漫流的方式缓慢流过该湿地表面，从而获得石油类污染物最佳的去除效果。

上述的石油降解菌固定化载体的制备方法：取已培养、驯化好的石油降解菌配制成浓度为5.70×10⁶个菌种/mL的菌浊液，并在其中加入质量比为2％的海藻酸钠，混合均匀后用喷壶均匀地喷洒到芦苇湿地的芦苇地表根须上，喷洒的菌浊液的量不低于单位地表面0.51L，石油降解菌在芦苇地表根须附着固定5小时后即制成石油降解菌固定化载体。

本发明工艺简单、成本低、易于操作、且净化效果好，广泛适用于河口地区对石油污染河流的净化。

具体实施方式

本发明选择辽河河口芦苇植株每平方米不低于90株的芦苇湿地(以保证芦苇湿地地表面被一层根须覆盖)4.18m²做为处理湿地，净化受石油污染的锦盘河河水。

实施例1

将实地采集的受石油污染的土壤10g，放入250ml锥形瓶，用100ml生理盐水充分混匀，待土壤中微生物全部释放到生理盐水后，静置待固液分离；然后自其上清液中移取1mL，加入液体富集培养基(液体培养基成分：柴油1g/L(125ul＝0.1g)，NaNO₃3.0g/L，K₂HPO₄0.5g/L，KH₂PO₄0.5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5g/L，KCl 0.5g/L，FeSO₄·7H₂O 0.001g/L，CaCl₂0.002g/L，pH 7.0-7.2)中，在30℃、120r·min^-1的条件下在振荡培养箱中培养7～10d；待培养液混浊后，再从中移取1ml液体，加入新的液体富集培养基中，培养条件同上，重复操作5次，使石油降解菌得到驯化，最后从液体富集培养集中吸取0.2ml菌液均匀涂布于固体筛选培养基平板上，30℃恒温培养，直至长出菌落；选择其中比较大的单菌落，划线转接入新的固体筛选培养基中，进行培养，获得石油降解的纯菌种。