[发明专利]通过对微生物的定量PCR分析来评价土壤健康的方法无效
| 申请号： | 201010523849.9 | 申请日： | 2010-10-28 |
| 公开（公告）号： | CN101974631A | 公开（公告）日： | 2011-02-16 |
| 发明（设计）人： | 全哲学;孟晗;任文伟;李壳 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/06 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人： | 陆飞;盛志范 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 通过 微生物 定量 pcr 分析 评价 土壤 健康 方法 | ||
【权利要求书】：
1.通过对微生物的定量PCR分析评价土壤健康的方法，其特征在于具体步骤如下：
步骤一、设计或选择可反映土壤健康的各种微生物基因的引物对；
步骤二、构建标准品质粒，并制作标准曲线；
步骤三、提取所要检测的土壤样品基因组DNA并检测所提取样品的DNA浓度；
步骤四、选择合适的稀释梯度进行定量PCR检测，并根据标准曲线算出样品中特定微生物基因的拷贝数；
步骤五、结合多种微生物基因拷贝数确定土壤健康情况。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于步骤一所选的微生物包括碳循环相关微生物，氮循环相关微生物，细菌、真菌和原生动物含量，菌根、致病细菌以及康生物抗性细菌。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于步骤二是用步骤一所设计的引物对对环境样品的DNA进行PCR扩增，对产物构建克隆文库，测序并从中选取合适的质粒作为检测标准品，从而建标准曲线。
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