[发明专利]一种海洋有机物降解盐单胞菌菌株GHMC414及其应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种海洋有机物降解盐单胞菌菌株(Halomonas sp.)及其在处理有机物污染海水中的应用。

背景技术

近年来，在海水网箱养殖产业飞速发展的同时，养殖“自身污染”问题日益凸现出来，其中养殖过程产生的有机物污染物常常会引发海水网箱养殖的水体发臭、沉积环境恶化，导致水中溶解氧降低，养殖鱼类死亡，水体生态平衡破坏。

海水网箱养殖系统作为一种高密度、高投饵的人工养殖生态系统，影响养殖环境最根本的原因在于养殖过程中产生的大量残饵、粪便及死亡动植物残骸等有机物的沉积。目前的物理和化学去除有机污染物方法都存有一定的局限性。其中物理方法存在效率低下，成本高的缺点；化学方法虽然见效快，但常引起二次污染。为达到对有机污染物快速、高效去除，本发明从海水养殖环境沉积物中富集分离纯化获得一株微生物，并用于对有机物污染的有效治理。

发明内容

本发明的第一个目的是提供一种海洋有机物降解盐单胞菌属菌株，该菌株具有高效有机物降解能力，能快速有效地去除海水环境中的有机物。

本发明的第二个目的在于提供上述海洋有机物降解盐单胞菌菌株在处理海水环境中有机物污染的应用。

本发明的第一个目的是通过如下技术方案来实现的：一种海洋有机物降解盐单胞菌菌株，该菌株属于盐单胞菌属(Halomonas sp.)，保藏名称：盐单胞菌GHMC414，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，地址：湖北省武汉市武昌珞珈山武汉大学保藏中心，保藏日期：2009年8月28日，保藏号：CCTCC NO：M209183。

所述海洋有机物降解盐单胞菌菌株的筛选分离鉴定过程为：取海水网箱养殖场区的沉积物，在实验室利用选择培养基培养后，分离纯化菌株，根据菌株对饵料有机物降解能力的强弱，最终筛选出一株对饵料有机物有较强降解能力的菌株，编号为GHMC414，然后根据菌株的菌落形态特征、培养特征和生理生化特征，及其16SrDNA基因序列经与Genbank中已登陆的基因序列进行对比分析发现，菌株GHMC414经鉴定为盐单胞菌属，命名为盐单胞菌(Halomonas sp.)GHMC414。

本发明的第二个目的在于提供上述海洋有机物降解盐单胞菌菌株在处理有机物污染海水中的应用。

在处理有机物污染海水中的具体过程为：取经上述分离纯化的盐单胞菌(Halomonas sp.)GHMC414单菌落，于活化扩大培养基中培养40-48h，按海水与菌液体积比为40-60∶1，将盐单胞菌(Halomonas sp.)GHMC414接种于含饵料有机物的海水中，25-28℃恒温振荡培养1-7d。

上述活化扩大培养基的组成优选为：蛋白胨5.0g，酵母膏1.0g，磷酸高铁0.1g，陈海水1000mL，pH 7.6-8.2，121℃灭菌20min。

本发明与现有技术相比具有以下优点：本发明从海水网箱养殖区沉积物中筛选得到的新菌株，对饵料有机物有较强的降解能力，在1-5d内对饵料有机物的COD去除率达30.1～45.3％。

附图说明

图1是菌株GHMC414的菌株电镜图片；

图2是菌株GHMC414的PCR产物琼脂糖电泳图；

图3是投加菌株GHMC414的高浓度饵料有机物海水中的可生化降解性(BOD/COD₀)；

图4是投加菌株GHMC414的高浓度饵料有机物海水中的生化耗氧量(BOD)变化图。

图5是投加菌株GHMC414的高浓度饵料有机物海水中的化学耗氧量(COD)变化图。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明做进一步说明，但不以任何形式限制本发明。

实施例1海水有机物降解菌株的筛选方法：

一、材料准备

1、菌源和实验废水

(1)菌源有20多年养殖历史的深圳市大鹏澳海水鱼类网箱养殖场区的沉积物。

(2)实验废水(含高浓度饵料有机物海水)：杂鱼糜5g，陈海水1000mL，pH 7.6～8.2，121℃灭菌20min。

2、培养基

(1)选择培养基：杂鱼糜20g，陈海水1000mL，pH 7.6～8.2，121℃灭菌20min。

(2)分离及斜面培养基：蛋白胨5g，酵母膏1g，磷酸高铁0.1g，琼脂粉20g，陈海水1000mL，pH 7.6～8.2。

(3)活化扩大培养基：蛋白胨5g，酵母膏1g，磷酸高铁0.1g，陈海水1000mL，pH 7.6～8.2。

3、实验仪器和设备