[发明专利]烟草烟碱脱甲基酶基因组克隆及其应用有效

申请号：	201010529662.X	申请日：	2005-04-20
公开（公告）号：	CN101979583A	公开（公告）日：	2011-02-23
发明（设计）人：	许冬梅	申请（专利权）人：	美国无烟烟草公司
主分类号：	C12N15/52	分类号：	C12N15/52;C12N15/82;A01H5/00;A01H5/10;A01H5/12
代理公司：	北京市柳沈律师事务所 11105	代理人：	张文辉
地址：	美国弗***	国省代码：	美国;US
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摘要：
搜索关键词：	烟草烟碱甲基基因组克隆及其应用
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【权利要求书】：

1.一种分离的核酸，包括与SEQ ID NO：1的核苷酸序列具有至少91％序列同一性的核苷酸序列。

2.权利要求1的核酸，其中所述核苷酸序列与SEQ ID NO：1的核苷酸2010-2949或3947-4562具有100％序列同一性。

3.权利要求1的核酸，其中所述核酸包含编码多肽的核苷酸序列，所述多肽与由SEQ ID NO：2编码的多肽具有99％或更大的氨基酸序列同一性。

4.权利要求1的核酸，其中所述核苷酸序列与SEQ ID NO：1的核苷酸序列具有100％同一性。

5.一种分离的核酸，包含核苷酸序列，所述核苷酸序列在严谨条件下与SEQ ID NO：1的核苷酸序列杂交，其中所述严谨条件包括在42℃在6xSSC中的开始的洗涤，随后在65℃进行一次或者多次另外的洗涤。

6.一种表达载体，包含核酸，其与SEQ ID NO：1具有至少91％的序列同一性，所述载体能够引导所述核酸的表达。

7.权利要求6的表达载体，其中所述核酸与SEQ ID NO：1具有100％的同一性。

8.一种用植物表达载体转化的烟草植物，所述表达载体包含与SEQ ID NO：1的核苷酸2010-2949或3947-4562具有至少91％序列同一性的核酸，并编码多肽，所述多肽包含与由SEQ ID NO：1编码的多肽的氨基酸序列具有99％或更大序列同一性的氨基酸序列，其中所述核酸在所述植物中表达，且所述植物具有减少的从烟碱到去甲烟碱的转化。

9.权利要求8的烟草植物，其中所述植物是烟草(Nicotiana tabacum)植物。

10.权利要求8的烟草植物，其中所述核酸包含与SEQ ID NO：1的核苷酸序列具有至少91％同一性的核苷酸序列。

11.一种由权利要求8的烟草植物产生的种子，所述种子包含所述表达载体。

12.一种来自转基因烟草植物的烟草叶片，其包含载体，所述载体包含与SEQ ID NO：1的25个或更多连续核苷酸具有至少91％序列同一性的核苷酸序列。

13.权利要求12的烟草叶片，所述核苷酸序列具有与SEQ ID NO：1的100个或更多连续核苷酸具有至少91％序列同一性。

14.权利要求13的烟草叶片，所述核苷酸序列具有与SEQ ID NO：1的250个或更多连续核苷酸具有至少91％序列同一性。

15.权利要求14的烟草叶片，所述核苷酸序列具有与SEQ ID NO：1的500个或更多连续核苷酸具有至少91％序列同一性。

16.权利要求12的烟草叶片，所述核苷酸序列具有与SEQ ID NO：1的核苷酸3947-4562的50个或更多连续核苷酸具有至少91％序列同一性。

17.权利要求16的烟草叶片，所述核苷酸序列具有与SEQ ID NO：1的核苷酸3947-4562的50个或更多连续核苷酸具有100％序列同一性。

18.权利要求16的烟草叶片，所述核苷酸序列具有与SEQ ID NO：1的核苷酸3947-4562的100个或更多连续核苷酸具有91％序列同一性。

19.权利要求18的烟草叶片，所述核苷酸序列具有与SEQ ID NO：1的核苷酸3947-4562的100个或更多连续核苷酸具有100％序列同一性。

20.权利要求19的烟草叶片，所述核苷酸序列具有与SEQ ID NO：1的核苷酸3947-4562的250个或更多连续核苷酸具有100％序列同一性。