[发明专利]一种抗微生物肽Pc-CATH1及其基因、化学合成方法和应用

权利要求书

1.一种抗微生物肽Pc-CATH1，是环颈雉Cathelicidin基因编码的一种直链多肽，其特征是其全序列为：精氨酸-异亮氨酸-赖氨酸-精氨酸-苯丙氨酸-色氨酸-脯氨酸-缬氨酸-缬氨酸-异亮氨酸-精氨酸-苏氨酸-缬氨酸-缬氨酸-丙氨酸-甘氨酸-酪氨酸-天冬酰胺-亮氨酸-酪氨酸-精氨酸-丙氨酸-异亮氨酸-赖氨酸-赖氨酸-赖氨酸。

2.权利要求1所述抗微生物肽Pc-CATH1的基因，其特征在于编码环颈雉抗微生物肽Pc-CATH1前体cathelicidin的基因由607个核苷酸组成，自5’端至3’端序列为：

1  ATGCTGAGCT GCTGGGTGCT GGTGCTGGCG CTGCTGGGGG GGGCCTGCGC CCTCCCGGCC

61 ATGCTGAGCT GCTGGGTGCT GGTGCTGGCG CTGCTGGGGG GGGCCTGCGC CCTCCCGGCC

121CCCCTGGGCT ACTCCCAGGC TCTGGCCCAG GCTGTGGACT CCTACAACCA ACGGCCTGAG

181GTGCAGAATG CCTTCCGGCT GCTCAGCGCC GACCCCGAGC CCGGCCCGAA CGTCCAGCTG

241GGCTCCCTGC ACAACCTCAA CTTCACCATC ATAGAGACGC GGTGCCAGGC GCGCTCGGGC

301GCCCAGCTCG ACAGCTGCGA GTTCAAGGAG GACGGGCTCG TCAAGGACTG CGCTGCGCCC

361GTGGTGCTGC AAGGCGGCCG CGCCACGTTC GATGTCACCT GCGTGGAGTC CGTGGCTGAC

421CCTGTCCGCA TCAAGCGCTT CTGGCCAGTG GTCATCAGGA CTGTGGTTGC AGGATACAAC

481CTCTACCGGG CAATCAAGAA GAAATGAGCC ATCCCCAGAG CTGCTGTCAC CAATGTCCCC

541TTGCTGCTTT CCATCCAATA AAGGTGTTTC CCAGCCTAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA

601AAAAAAA

编码环颈雉cathelicidin成熟肽Pc-CATH1为第367-445位核苷酸，其氨基酸序列为：Arg¹ Ile² Lys³ Arg⁴ Phe⁵ Trp⁶ Pro⁷ Val⁸ Val⁹ Ile¹⁰ Arg¹¹ Thr¹² Val¹³ Val¹⁴ Ala¹⁵ Gly¹⁶ Tyr¹⁷ Asn¹⁸Leu¹⁹ Tyr²⁰ Arg²¹ Ala²² Ile²³ Lys²⁴ Lys²⁵ Lys²⁶

3.权利要求1所述Pc-CATH1的化学合成方法，其特征在于根据编码环颈雉cathelicidin抗微生物肽基因推断的成熟肽Pc-CATH1氨基酸序列，用自动多肽合成仪合成其全序列；通过HPLC反相柱层析脱盐纯化，并确定其纯度大于95％；用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测定其分子量。

4.权利要求2所述抗微生物肽Pc-CATH1基因的应用，其特征在于，合成的Pc-CATH1抗菌肽具有杀菌作用，溶于灭菌超纯水，用于药理活性检测。