[发明专利]一种人参皂苷Re的提取分离方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种人参皂苷Re的提取分离方法，属于医药卫生保健领域。 

背景技术：

人参皂苷Re(ginsenoside-Re)是人参三醇系皂苷中的一种，是人参中含量较多的皂苷之一，尤其在花和茎叶中含量很高。现代药理学研究证明了人参皂苷Re在抗氧化应激损伤，提高免疫力，抗癌，益智等方面的药理活性，并从分子层面解释了其药理作用机制，这不仅佐证了中国医学古籍中的人参用法，而且进一步提示了人参皂苷Re在对抗心肌梗死，治疗老年痴呆，促进智力发育等疾病的治疗方面可能具有广阔的应用前景。 

由于人参皂苷结构复杂，目前仍不能合成任何一种皂苷单体，人参皂苷仍然是从植物中提取而获得。人参皂苷单体Re生产的工艺是以三七，人参，西洋参的根，花或茎叶等为原料，经过乙醇回流，超声，或者微波等提取的方式得到提取液，经过反复的柱层析，以总皂苷-三醇组皂苷-皂苷单体的顺序分离而得到。除此之外还有高速逆流色谱法(HSCCC)，近年来广泛用于中药有效成分的分离。无论是利用大孔吸附树脂进行分离的液-固色谱法还是HSCCC法，它们的分离操作基础是是皂苷之间理化性质的差异，由于皂苷之间结构相似，理化性质差别小，单体之间的分配行为接近，分离难度大，大孔吸附树脂法的洗脱过程需要使用大量的有机溶剂，实验成本高，周期长，工业化生产困难较大，而HSCCC法虽然提取得到的产品纯度较高，但分离效率不如气相色谱和高效液相色谱技术，不适用于大规模的工业化生产，虽然分离技术近年来发展迅速，可以应用于工业化生产的方法却很少，因此皂苷单体的获得方法的局限一直是制约人参皂苷单体科学研究和临床应用的主要因素，即使是对于含量较大的皂苷Re而言也并没有可以用于工业化生产的提取分离方法。 

文献中关于人参皂苷Re的提取分离方法的专利接近的共有以下几篇：孙贺成[专利公开号：CN101538308A]以人参果为原料药以HSCCC法分离获得人参皂苷Re单体，纯度达到98％以上。徐菲菲[专利公开号：CN1650876A]以水作为起步溶剂，以人参为原料，提取液经浓缩后经大孔吸附树脂吸附，低浓度醇洗脱，用甲醇-水交替结晶，得到纯度为95％以上的Re单体。桂明玉[专利公开号：CN1869059A]将人参有效成分提取后通过氧化铝柱层析方法获得单体皂苷。王一涛[专利公开号：CN101575357]以三七总皂苷或三七中间体为原料采用制备型高效液相色谱法梯度洗脱，得到Re纯度在97％以上。上述方法的特点在于以大孔吸附树脂或HSCCC技术分离得到人参皂苷Re，起始原料为人参或人参能提取物，虽然得到样品纯度高但不适用于工业化生产。 

发明内容：

本发明的目的在于提供一种能够适应工业化生产要求的人参皂苷Re的提取分离方法，本发明提供的人参皂苷Re的提取方法包括以下工艺步骤： 

1.原料的浸泡及煎煮 

将含量为60％-95％的乙醇提取液按原料与提取液的重量份数比为1∶5-1∶20的比例加入，常温浸泡1-3小时后，加热保持微沸状态1-3小时，趁热过滤，收集滤液，重复提取操作1-3 次，合并滤液。 

2.提取液的浓缩 

将步骤1中的滤液在减压条件下浓缩至原提取液体积的1/3-1/4。 

3.乙醇沉淀 

向步骤2中得到的浓缩液中加入其体积2-5倍的低浓度的乙醇进行沉淀，沉淀溶剂中乙醇的含量20％-50％，静置1-24h后，过滤，收集滤液。 

4.提取液的再浓缩 

将步骤3中的到的滤液再次进行减压浓缩，至原体积的1/3-1/4。 

5.有机溶剂萃取 

向步骤4中得到的浓缩液中加入一定量的有机溶剂进行萃取，萃取比例为1∶1-1∶3，萃取溶剂为乙醚，乙酸乙酯，三氯甲烷中的一种或几种，萃取次数为1-3次，收集下层水相。 

6.静置 

挥干水相中的有机溶剂，静置2-24小时，有白色沉淀析出，过滤的到白色粉末状物质，经液相色谱检测该白色粉末中的主要成分是Re，以归一化法计算，Re的含量大于60％。 

本发明所涉及到的人参皂苷Re的提取方法与现有技术的主要优点在于： 

(1)利用该方法得到得到人参皂苷Re工艺过程简单，周期短，生产成本低，杂质含量少，生产过程不使用毒性强的有机溶剂，更有利于环保。 

(2)利用该方法生产得到的Re可以作为药品生产的原料或经进一步精制得到标准品，由于其他杂质含量少，精制的成本大大降低。