[发明专利]一种氯代毒素修饰的脑胶质瘤靶向基因递释复合物及其制备方法

权利要求书

1.一种氯代毒素修饰的脑胶质瘤靶向基因递释复合物，其特征在于，由氯代毒素修饰的基因递释载体和治疗基因质粒DNA构成，所述的氯代毒素修饰的基因递释载体由阳离子高分子材料、亲水性聚合物和氯代毒素组成；其中，氯代毒素作为靶向头基，阳离子高分子材料为基础载体，通过亲水性聚合物连接氯代毒素构筑形成基因递释载体，该基因递释载体与治疗基因质粒DNA构筑成基因递释复合物；所述的亲水性聚合物与阳离子高分子材料的分子比是1~20:1，氯代毒素与阳离子高分子材料的分子比为1~10:1，所述的阳离子高分子材料与治疗基因质粒DNA的质量比是1~20:1。

2.按权利要求1所述的氯代毒素修饰的脑胶质瘤靶向基因递释复合物，其特征在于，所述的复合物的尺寸为50～400 纳米。

3.按权利要求1所述的氯代毒素修饰的脑胶质瘤靶向基因递释复合物，其特征在于，所述的阳离子高分子材料选自聚酰胺-胺型树状分枝物、树枝状聚赖氨酸、壳聚糖、聚乙烯亚胺、聚赖氨酸、聚甲基丙烯酸、聚甲基丙稀酰胺、聚氨基酰胺或阳离子脂质。

4.按权利要求1所述的氯代毒素修饰的脑胶质瘤靶向基因递释复合物，其特征在于，所述的亲水性聚合物选自聚乙二醇、聚氧乙烯或聚-N-(2-羟丙基)-甲基丙稀酰胺。

5.按权利要求1所述的氯代毒素修饰的脑胶质瘤靶向基因递释复合物，其特征在于，所述治疗基因质粒DNA选自质粒pORF-TRAIL和肿瘤抑制基因P53、PTEN、P21或P16。

6.权利要求1所述的氯代毒素修饰的脑胶质瘤靶向基因递释复合物的制备方法，其特征在于，其包括步骤：将制备的阳离子高分子材料-亲水性聚合物-氯代毒素基因递释载体溶于pH值7.3～7.5磷酸盐缓冲液中配制成所需浓度的溶液，将治疗基因质粒DNA溶于50 mM 硫酸钠溶液中配制成所需浓度的溶液，室温下两者等体积漩涡30 s混匀制成基因递释复合物。

7.按权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的基因递释复合物为50～400 纳米。

8.按权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的基因递释载体中，阳离子高分子材料、亲水性聚合物和氯代毒素以共价方式连接。

9.按权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的基因递释载体通过下述步骤制备：

阳离子高分子材料和亲水性聚合物以1:1~20的分子比溶于pH值7.8～8.2磷酸盐缓冲液中，室温搅拌反应60～180分钟，两种分子中含有的基团发生特异性反应，生成阳离子高分子材料-亲水性聚合物，超滤法除去未反应的亲水性聚合物并更换为pH值6.8～7.2磷酸盐缓冲液；同时，氯代毒素与巯基化试剂反应后引入巯基，以1～10:1的分子比与阳离子高分子材料-亲水性聚合物上的特异基团室温搅拌反应12～36小时后生成阳离子高分子材料-亲水性聚合物-氯代毒素，分子排阻色谱法除去未反应的氯代毒素。