[发明专利]一种厚壳贻贝抗菌肽及制备方法和用途无效
申请号: | 201010535181.X | 申请日: | 2010-11-01 |
公开(公告)号: | CN102020709A | 公开(公告)日: | 2011-04-20 |
发明(设计)人: | 廖智;武梅;王健鑫;范美华;石戈;王日昕 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋学院 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C12N15/12;C12N15/81;C12N1/19;A61K38/17;A61P31/04;A23K1/17;C12R1/865 |
代理公司: | 宁波诚源专利事务所有限公司 33102 | 代理人: | 袁忠卫;景丰强 |
地址: | 316000 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 贻贝 抗菌 制备 方法 用途 | ||
1.一种厚壳贻贝抗菌肽,其特征在于该抗菌肽的myticin cDNA基因的开放阅读框核苷酸序列如下:
atgaaggcaa caatcttgtt agcggttgta gtggcagtct ttgtcgcagg tacggaagct 60
cattcgcatg cttgcgcatc gtactactgt agcaagttct gtgggactgc tagttgcaca 120
cattacttat gccgagtact tcatcccggg aaactttgcg tctgtgttaa ttgcagcagg 180
gtaaaaaatc ctttcagagc tactcaagat gctaaaagta ttaacgaatt ggattacact 240
ccactaatga agtcgatgga aaatttggac aacggaatgg atatgttata a 291。
2.根据权利要求1所述的厚壳贻贝抗菌肽,其特征在于该抗菌肽的myticin cDNA基因的开放阅读框的编码蛋白质前体包括
信号肽:MKATILLAVV VAVFVAGTEA;
成熟肽:HSHACASYYC SKFCGTASCT HYLCRVLHPG KLCVCVNCSR;以及
成熟肽后区域:VKNPFRATQD AKSINELDYT PLMKSMENLD NGMDML。
3.一种权利要求1所述的厚壳贻贝抗菌肽的制备方法,其特征在于包括如下步骤:
cDNA基因的克隆:用TRIzol试剂盒从厚壳贻贝血细胞中提取总RNA,用MMLV反转录为cDNA的第一链;根据厚壳贻贝的myticin的氨基酸序列保守区域设计简并引物,经扩增后得到厚壳贻贝抗菌肽myticin的cDNA编码框;
序列分析和比对:获得的序列数据经lasergen软件中的Editseq模块进行分析,进行载体序列去除,序列拼接以及ORF分析后进行在线BLAST搜索。
4.一种表达载体,其特征在于它含有权利要求1所述的核苷酸。
5.一种重组工程菌,其特征在于它含有权利要求3所述的表达载体。
6.根据权利要求4所述的重组工程菌,其特征在于它的表达载体转化酿酒酵母得到的。
7.权利要求1所述的厚壳贻贝抗菌肽在制备抗生素中的应用。
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