[发明专利]杨梅突发性枝叶凋萎病病原菌鉴定方法

权利要求书

1.一种杨梅突发性枝叶凋萎病病原菌鉴定方法，其特征在于它包括：(1)、用解剖刀小心分离发病杨梅枝干的木质部和韧皮部，韧皮部和木质部分别剪成3-4mm²的小块组织，不需要表面消毒，轻轻放置到PDA平板上，在25℃恒温箱培养2d后，挑取绒毛状真菌菌丝，转接到一个新的PDA平板上，25℃恒温箱继续培养5d后，取0.5cm²的纯化菌丝块用来做致病性接种实验；(2)、在培养皿内平铺好滤纸，用无菌水浸湿，取新生的杨梅嫩梢，剪成5-6cm长的短枝，使9cm的培养皿能水平放置2根短枝；每根短枝上撕掉两个叶片并露出叶痕，用步骤1中获得的0.5cm²的纯化菌丝块轻轻放置到露出的叶痕位置，把短枝的两端用脱脂棉吸水保湿；置于25℃的培养箱内，12h光照和12h黑暗；培养4天后调查杨梅嫩梢的发病情况；如果接种的叶痕位置变黑即为拟盘多毛孢属致病症状。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：该方法还包括在田间进一步的验证实验，包括如下步骤：在自然条件下，把步骤1中获得的适当大小的脱脂棉吸无菌水缠到嫩梢顶端下的第10片叶位置的枝条上，撕掉距杨梅树嫩梢顶端的第3或4片叶，把0.5cm²的纯化菌丝块轻轻放置到露出的叶痕位置，用保鲜膜条轻轻固定菌块，用保鲜袋保湿；接种后4天调查杨梅嫩梢的发病情况；如果接种的叶痕位置变黑即为拟盘多毛孢属致病症状。如果症状为然后沿着枝干慢慢延伸，到叶柄位置会沿着叶柄位置延伸到整个叶片变黑更为确定为拟盘多毛孢属致病症状。