[发明专利]氰戊菊酯农药检测方法

权利要求书

1.一种氰戊菊酯农药检测方法，其特征在于：使用预先制得的DNA电化学生物传感器对待测物进行检测，所述DNA电化学生物传感器包括作为基体的碳纤维电极，在所述碳纤维电极表面由内至外依次层叠设置有过氧化聚吡咯膜、纳米金层以及DNA层；氰戊菊酯在DNA电化学生物传感器上发生电化学行为，通过测定氰戊菊酯的DPV峰电流值，进而根据预先确定的表征氰戊菊酯的DPV峰电流值与其浓度之间关系的线性回归方程得出氰戊菊酯的浓度。

2.如要求1所述的氰戊菊酯农药检测方法，其特征在于，所述DNA电化学生物传感器的制备包括如下步骤：

制备碳纤维电极步骤：将碳纤维进行清洗、干燥后与电极引线铜丝用导电胶粘连，待导电胶干后，将碳纤维的一端置于酒精灯外焰灼烧以进一步清除其表面的氧化物；拉制玻璃毛细管的一端，形成内径较另一端要细的尖端，将碳纤维从玻璃毛细管另一端穿入，并自拉细了的尖端露出1~2mm，再用粘胶将玻璃毛细管两端封住，待粘胶固化后可得到碳纤维电极；

吡咯的聚合与过氧化步骤：将碳纤维电极经清洗后再进行如下预处理：分别依次在30wt%HNO₃溶液、丙酮溶液、乙醇溶液中浸泡10~20min、5~10min、5~10min，然后，将该碳纤维电极在0.5mol/L的H₂SO₄溶液中，-0.2V~1.2V范围内扫描10~20圈，扫描速率为100mV/s，待循环伏安曲线稳定后，将碳纤维电极洗涤干净、干燥后备用；将预处理好的碳纤维电极浸入到0.2mol/L吡咯溶液中，以50mV/s的扫描速度在-0.35V~0.85V范围内循环伏安扫描10次；将聚合有吡咯膜的碳纤维电极清洗后晾干，再置于pH=7.0的Tris-HCl缓冲溶液中，以Ag/AgCl为参比电极在1.5V下进行过氧化处理，得到Ppyox/CFE修饰电极；

电沉积纳米金步骤：以Ag/AgCl作为参比电极，铂片电极作为对电极，修饰有过氧化聚吡咯膜的碳纤维电极作为工作电极，置入0.5mmol/L的HAuCl4溶液，该溶液中还含有含有0.05mol/L的KCl，采用循环伏安法，在0.24V～-0.96V内以50mV/s的扫描速率，扫描15圈，得到nano-Au/Ppyox/CFE修饰电极；

固定DNA步骤：将制备好的nano-Au/Ppyox/CFE修饰电极冲洗后浸入到0.1mg/ml CTDNA溶液中，在1.5V（vs.Ag/AgCl）下富集30min，取出电极后冲洗除去电极上未稳定吸附的DNA，从而得到DNA/nano-Au/Ppyox /CFE修饰电极，亦即DNA电化学生物传感器。

3.如权利要求2所述的氰戊菊酯农药检测方法，其特征在于：制备碳纤维电极步骤中，所述碳纤维是依次用丙酮、乙醇和二次蒸馏水超声清洗3~5 min。

4.如权利要求3所述的氰戊菊酯农药检测方法，其特征在于：制备碳纤维电极步骤中所用引线铜丝直径0.2mm，长度10cm。

5.如权利要求2所述的氰戊菊酯农药检测方法，其特征在于：制备碳纤维电极步骤中所用粘胶由环氧树脂与乙二胺体积比5：1混合均匀制得。

6.如权利要求2所述的氰戊菊酯农药检测方法，其特征在于：吡咯的聚合与过氧化步骤中，预处理前的碳纤维电极以及聚合有吡咯膜的碳纤维电极均是用二次蒸馏水超声清洗3~5min。

7.如权利要求2所述的氰戊菊酯农药检测方法，其特征在于：吡咯的聚合与过氧化步骤中，所述吡咯溶液的支持电解质为1.0mol/LKCl。

8.如权利要求2所述的氰戊菊酯农药检测方法，其特征在于：固定DNA步骤中，nano-Au/Ppyox/CFE修饰电极在浸入到CTDNA溶液之前以及浸泡完成自该溶液中取出后均用二次蒸馏水进行冲洗。

9.如权利要求1~8任一项所述的氰戊菊酯农药检测方法，其特征在于：氰戊菊酯的DPV峰电流与其浓度之间的关系，在9.5×10^-8～9.5×10^-6mol/L浓度范围内呈线性关系，线性回归方程为：                                               ，检出下限为3.0×10^-8 mol/L。