[发明专利]棉铃虫保幼激素结合蛋白及其编码基因和应用

权利要求书

1.一种蛋白质，是如下(a)或(b)：

(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与棉铃虫生长相关的由序列1衍生的蛋白质。

2.编码权利要求1所述蛋白的基因，是如下1)或2)或3)或4)的DNA分子：

1)序列表中序列2自5’端第12至740位核苷酸所示的DNA分子；

2)序列表中序列2所示的DNA分子；

3)在高严谨条件下与1)或2)限定的DNA序列杂交且编码棉铃虫生长相关蛋白的DNA分子；

4)与1)或2)限定的DNA序列具有90％以上同源性且编码棉铃虫生长相关蛋白的DNA分子。

3.含有权利要求2或3所述基因的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。

4.含有序列表的序列2自5’末端第207至689位核苷酸的DNA片段或序列表的序列6所示的RNA。

5.如权利要求4所述的DNA片段，其特征在于：所述DNA片段为DNA片段甲、DNA片段乙或DNA片段丙；

所述DNA片段甲如序列表的序列2自5’末端第207至689位核苷酸所示；

所述DNA片段乙如序列表的序列2自5’末端第204至691位核苷酸所示；

所述DNA片段丙为含有正向序列和反向序列的DNA，所述正向序列如序列表的序列4自5’末端第15至497位核苷酸所示，所述反向序列如序列表的序列4自5’末端第711至1193位核苷酸所示；所述DNA片段丙优选为序列表的序列4所示DNA。

6.含有权利要求4或5所述DNA片段的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。

7.如权利要求6所述的重组表达载体，其特征在于：所述重组表达载体为如下(I)或(II)：

(I)将所述DNA片段丙插入重组质粒pC2300PN的多克隆位点得到的重组质粒；所述重组质粒pC2300PN为以植物表达载体pCAMBIA2300为骨架载体，在Pst I和EcoRI酶切位点之间插入序列表的序列8自5’末端第12至295位核苷酸所示的DNA，在PstI和HindIII酶切位点之间插入序列表的序列9自5’末端第14至194位核苷酸所示的DNA，得到的重组质粒；

(II)将所述DNA片段甲或所述DNA片段乙插入细菌表达载体L4440的多克隆位点得到的重组质粒；

所述重组菌为将(II)所述的重组质粒导入大肠杆菌HT115(DE3)得到重组菌。

8.一种培育转基因植物的方法，是将权利要求5所述的DNA片段丙导入目的植物中，得到抗棉铃虫能力高于所述目的植物的转基因植物。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于：所述DNA片段丙通过权利要求7的(I)所述的重组质粒导入所述目的植物；所述目的植物为单子叶植物或双子叶植物；所述双子叶植物优选为烟草。

10.一种用于杀死棉铃虫的制剂，其活性成分为双链RNA，所述双链RNA的一条链如序列表的序列6自5’端第16至503位核苷酸所示。