[发明专利]微生物法制备艾利西平的一种合成工艺

权利要求书

1.一种艾利西平的制备方法，其特征在于，以奥卡西平为底物，以酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)CGMCC No.2230发酵获得的含酶菌体细胞为生物催化剂，进行生物转化反应制得艾利西平。

2.根据权利要求1所述的艾利西平的制备方法，其特征在于所述方法包括，在pH 5.0～8.0的磷酸盐缓冲液中，以乙酰乙酸乙酯和为奥卡西平底物、以酿酒酵母CGMCC No.2230发酵获得的含酶菌体细胞为生物催化剂，于25～45℃下进行转化反应8～40小时，得到所述艾利西平。

3.如权利要求1或2所述的艾利西平的制备方法，其特征在于所述奥卡西平在磷酸盐缓冲液中的初始浓度为0.05～0.5mol/L。

4.如权利要求2所述的艾利西平的制备方法，其特征在于所述含酶菌体细胞用量以细胞干重计为1～50g/g底物。

5.如权利要求2所述的艾利西平的制备方法，其特征在于所述磷酸盐缓冲液中添加5％的乙醇作为助溶剂。

6.如权利要求2所述的艾利西平的制备方法，其特征在于所述磷酸盐缓冲液中添加有50～150g/L的葡萄糖作为辅助底物。

7.如权利要求1，2或4所述的艾利西平的制备方法，其特征在于所述含酶菌体细胞由如下方法制备得到：将酿酒酵母CGMCC No.2230接种至发酵培养基中，培养温度为26～35℃，摇床转速为150～200r/min，培养18～30h得到含有含酶菌体细胞的发酵液；所述发酵培养基按如下组成配制：葡萄糖26～32g/L，酵母粉2～4g/L，硫酸铵3～6g/L，无水MgSO₄0.2～0.4g/L，K₂HPO₄·3H₂0 0.5～1.5g/L，KH₂PO₄ 0.6～1.5g/L，自然pH值，溶剂为水。

8.如权利要求2所述的艾利西平的制备方法，其特征在于所述艾利西平的分离纯化方法如下：反应结束后将转化液加入等体积正己烷连续萃取5次，正己烷层加入无水硫酸钠脱水，抽滤后，得到的正己烷溶液蒸馏除去正己烷即得所述艾利西平。