[发明专利]雷帕霉素或其衍生物的制备色谱纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及应用高压制备系统分离纯化雷帕霉素或其衍生物的方法

背景技术

雷帕霉素是由吸水链霉菌产生的大环三烯抗生素，发现它具有体外和体内抗真菌活性，特别是抗白色念珠菌[C.Vezina等人，J.Antibiot.28，721(1975)；S.N.Sehgal等人，J.Antibiot.28，727(1975)；H.A.Baker等人，J.Antibiot.31，539(1978)；美国专利3,929,992和美国专利3,993,749]。

雷帕霉素具有抗肿瘤(美国专利4,885,171和4,401,653)和免疫抑制作用[FASEB3，3411(1989)]，其用途包括预防或治疗系统性红斑疮[美国专利5,078,999]，肺炎[美国专利5,080,899]，胰岛素依赖型糖尿病[炎性疾病研究协会第五次国际会议(Fifth Int.Conf.Inflamm.Res.Assoc.)121(摘要)，(1990)]，平滑肌细胞增生及血管损伤引起的内膜变厚[Morris，R.J.心肺移植(Heart Lung Transplant)11(pt.2)；197(1992)]，成年人T细胞白血病/淋巴瘤[EP525，960A1]和眼炎[EP532，862A1]。雷帕霉素(结构式II)和雷帕霉素衍生物包括依维莫司(结构式III)、泰姆西罗莫司(结构式Ⅳ)一直被研究用于治疗这些以及其它疾病。

结构式II

结构式III

结构式IV

依维莫司又名40-O-(2-羟基)乙基雷帕霉素，英文名everolimus，其合成描述于美国专利NO.5,665,772和国际专利公开NO.WO94/09010中。其精制纯化专利描述于美国专利NO.6,605,613B2，用乙酸乙酯和正己烷精制得到晶型固体。

泰姆西罗莫司又名CCI-779、2，2-二(羟甲基)丙酸雷帕霉素42-酯，其合成描述于CN1059905C和WO95/28406。其精制纯化专利描述于US2006178392A1用甲基叔丁基醚精制或甲基叔丁基醚与正己烷精制得到晶型固体；US2007129395A1用乙醚精制得到晶型固体。

雷帕霉素及其衍生物一般纯化都是采用精制方法，而用精制方法并不能保证一次精制就能得到高纯度样品。WO2008065887公开了雷帕霉素衍生物制备色谱纯化方法，该发明需要通过先正相制备再反相制备才能达到提纯目的。【现有技术中关于雷帕霉素的提纯方法有哪些？如何提纯雷帕霉素？】

发明内容

因此，本发明的目的是提供了一种利用正相制备色谱分离纯化雷帕霉素或其衍生物的方法；

本发明的另一发明目的是提供了一种利用反相制备色谱分离纯化雷帕霉素或其衍生物的方法；

本发明的目的在于单独使用正相或反相制备色谱纯化技术，提纯高纯度雷帕霉素或其衍生物，而不需进一步精制纯化，从而提高了效率，降低产品成本。

本发明涉及的一种式(I)雷帕霉素或其衍生物的制备色谱纯化方法，其特征在于，将式(I)的雷帕霉素或其衍生物吸附于制备色谱固定相，经一步色谱纯化得到纯度99％以上的产物。

式(I)

其中R是指氢、烷基、烷基硅氧烷基、芳基烷基、羟烷基、烷氧基烷基、氨基烷基、烷基氨基烷基、烷氧羰基氨基烷基、酰基氨基烷基、芳基、(四氢吡喃-2-基氧基)乙酰基、羟基乙酰基、2，2-二甲基-3-(四氢吡喃-2-基氧基)丙酰基、3-羟基-2，2-二甲基丙酰基、2，2-二甲基[1，3]二氧杂环戊烷-4-酰基、2，3-二羟基丙酰基、3-羟基-2-羟甲基丙酰基、2，2-双(羟甲基)丙酰基。其中所述的烷基或烷氧基是指C₁～C₆的烷基或烷氧基；其中所述的芳基是苯基或取代苯基，苯基上的取代基选自C₁～C₅烷基、羟基、硝基、磺酸基或卤素。其中所述的式(I)具体是指雷帕霉素、依维莫司、泰姆西罗莫司。