[发明专利]一种新型酯酶及其应用

权利要求书

1.一种新型酯酶的DNA，其特征是：它的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一种新型酯酶，其特征是：它的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

3.权利要求1或2所述的新型酯酶的宏基因组学克隆方法，其特征是：提取海底泥的总DNA并纯化，将纯化后的总DNA经BamHI酶切，连接pUC118载体，电击转化大肠杆菌DH5α高效感受态建立宏基因组文库，通过点平板和滴加底物显色法快速筛选得到阳性克隆子，经测序和BLAST比较并设计引物，从而克隆到目的片段。

4.一种包含权利要求1所述的新型酯酶的DNA的表达载体。

5.一种重组酯酶的制备方法，其特征是：包括用权利要求4所述的表达载体转化寄主细胞，培养转化体，从培养物中获得重组酯酶。

6.根据权利要求5所述的重组酯酶的制备方法，其特征是：其中寄主细胞是大肠杆菌。

7.根据权利要求6所述的重组酯酶的制备方法，其特征是：其具体过程为：包括用权利要求4所述的表达载体的目的片段经BamHI、HindIII双酶切，与pET-28a(+)载体连接，转化至大肠杆菌BL21，经IPTG诱导，得到高效可溶性表达。

8.根据权利要求7所述的重组酯酶的制备方法，其特征是：所述的IPTG终浓度为0.1-1.3mM，诱导温度为18-37℃。

9.一种重组酯酶，其特征是：包括用权利要求4所述的表达载体转化的寄主细胞，培养转化体，从培养物中获得重组酯酶的步骤的方法制备。

10.权利要求9所述的重组酯酶在降解拟除虫菊酯农药残留中的应用。