[发明专利]4，5双氢噻嗪酮格尔德霉素及其制备方法

权利要求书

1.一种格尔德霉素基因工程衍生物，其特征是，所述衍生物4，5双氢噻嗪酮格尔德霉素的化学结构如式(1)所示：

2.制备权利要求1所述衍生物的方法，其特征是，该方法的主要步骤依次为：

吸水链霉菌17997 P450单加氧酶基因(gdmP)阻断变株的构建；

4，5双氢噻嗪酮格尔德霉素的发酵、提取。

3.权利要求2所述的制备方法，其特征是，产生4，5双氢噻嗪酮格尔德霉素所用变株的构建是，根据GenBank DQ914285 gdmP基因序列设计引物，以吸水链霉菌17997基因组为模板，进行PCR，分别获得与gdmP基因同源的两个片段，在其中间以相应的酶切位点插入选择性标记基因，并通过构建大肠杆菌/链霉菌穿梭质粒获得用于gdmP基因阻断的重组载体；将重组载体导入吸水链霉菌17997中，根据选择性标记筛选转化子；利用PCR方法鉴定确认，gdmP基因序列中插入了选择性标记基因，从而获得吸水链霉菌17997gdmP基因阻断变株。

4.权利要求2或3所述的制备方法，其特征是，在新鲜培养的吸水链霉菌17997gdmP基因阻断变株斜面或平板培养基中加入卡那霉素，挖块接种于液体种子培养基中，28℃振荡培养24-48h；5％转种量接种于液体发酵培养基，28℃继续振荡培养，至120-144h，获得吸水链霉菌17997gdmP基因阻断变株的发酵培养液；发酵液过滤后，用滤液二分之一体积的乙酸乙酯提取，薄膜浓缩后上硅胶柱，以二氯甲烷∶甲醇19∶1进行洗脱，分部收集洗脱液，用岛津LC-10Avp高压液相色谱仪，SPD-M10AvP二极管阵列检测器，CLASS-VP工作站，以254nm进行HPLC检测，汇总含4，5双氢噻嗪酮格尔德霉素化合物部分洗脱液，浓缩后用制备型HPLC，ODS-C18柱，甲醇∶水9∶11(v/v)，流量每分钟5毫升，获得4，5双氢噻嗪酮格尔德霉素纯品。

5.权利要求1所述衍生物在制备抗病毒药物中的应用。

6.权利要求1所述衍生物的药物组合物，系以所述衍生物为有效成分，与药学上可接受的一种或多种载体所组成。

7.权利要求6所述组合物在制备抗病毒药物中的应用。