[发明专利]蛋白酶体抑制剂MG132作为菊酯类杀虫剂增效剂的应用

说明书

技术领域

本发明涉及蛋白酶体抑制剂MG132的一种新功能，具体是蛋白酶体抑制剂MG132作为菊酯类杀虫剂增效剂的应用。

背景技术

 使用有机杀虫剂是消灭农林、卫生害虫，保证农林作物增产和人民身体健康的重要手段。然而，随着有机杀虫剂的广泛使用和剂量增加，导致了害虫抗药性的发生及发展，增大了利用杀虫剂消灭害虫的难度，加剧了对环境的破坏和对人类健康的威胁。因此，寻找有效方法，提高害虫对有机杀虫剂的敏感性是目前迫切需要解决的问题。

 蛋白酶体是生物体内的一种巨型蛋白质复合物，主要作用是降解细胞不需要的或受到损伤或折叠错误的的蛋白质。蛋白酶体也是一类抗原递呈系统（Class I Antigen Presentation）的重要成员。MG132是一种蛋白酶体抑制剂，它可以与蛋白酶体的催化亚基结合从而抑制蛋白酶体的功能。

发明内容

本发明的目的是提供蛋白酶体抑制剂MG132的一种新用途。

 本发明的技术方案是：蛋白酶体抑制剂MG132可以作为菊酯类杀虫剂增效剂的应用。

 上述技术方案中所说的菊酯类杀虫剂可以是但不仅限于溴氰菊酯。

 上述技术方案中所说的蛋白酶体抑制剂可以是但不仅限于MG132.

发明人使用蛋白酶体抑制剂MG132抑制抗溴氰菊酯蚊细胞的蛋白酶体功能，随后用CCK-8法对细胞存活率进行检测。结果显示，使用蛋白酶体抑制剂MG132处理抗溴氰菊酯蚊细胞后，细胞在溴氰菊酯作用下的存活率较对照组明显降低（P<0.05）,表明蛋白酶体抑制剂MG132增加了蚊细胞对溴氰菊酯的敏感性。

参照世界卫生组织蚊幼虫生物测定的标准方法，进一步用蛋白酶体抑制剂MG132和溴氰菊酯共同对蚊的四龄幼虫进行生物测定。结果显示，用蛋白酶体抑制剂MG132处理的蚊四龄幼虫的存活率较对照组明显降低（p<0.05）,表明蛋白酶体抑制剂MG132增加了蚊幼虫对溴氰菊酯的敏感性。该实验使用了3种不同抗性水平的蚊幼虫进行检测，3次结果一致。

体内和体外的实验结果均表明，蛋白酶体抑制剂MG132可以增加蚊对溴氰菊酯的敏感性。

蛋白酶体抑制剂MG132 已经作为商品化试剂被应用于科学研究及其他领域。由于其可以增加蚊虫对溴氰菊酯的敏感性，其作为溴氰菊酯杀虫剂的增效剂的应用可以理解。具体的应用可以是但不仅限于以下方式，如将蛋白酶体抑制剂MG132添加到溴氰菊酯中，可以增强杀虫剂的功效。

本发明的有益效果体现在，提供了蛋白酶体抑制剂MG132的一种新用途，为研制新型高效的有机杀虫剂，提供了新途径。

附图说明

图1是不同浓度的MG132对蚊抗性细胞存活率的影响。

图2是MG132处理后蚊抗性细胞对溴氰菊酯抗性的改变。

图3是不同浓度的MG132 对蚊幼虫存活率的影响。

具体实施方式

实施例中所用的MG132购自美国Santa cruz公司，溴氰菊酯购自美国Sigma公司。

除非特别说明，本发明中所使用的术语，一般为本领域普通技术人员通常理解的含义。

下面结合具体的实施例，并参照数据进一步详细地描述本发明。这些实施例只是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制本发明的范围。

在以下的实施例中，未详细描述的各种过程和方法是本领域中公知的常规方法。所用试剂的来源、商品名以及有必要列出其组成成分者，均在首次出现时标明，其后所用相同试剂如无特殊说明，均以首次标明的内容相同。

实施例1 蛋白酶体抑制剂MG132增加抗溴氰菊酯蚊细胞对溴氰菊酯的敏感性。

正常蚊C6/36细胞购自中国典型培养物保藏中心，在本实验室用溴氰菊酯逐代筛选70余代，建立抗溴氰菊酯蚊C6/36细胞系,LC50为1256.8mg/ml，是正常蚊细胞的8.9倍。

发明者先设置一系列浓度梯度的MG132（0uM – 4 uM）作用于抗溴氰菊酯蚊细胞，检测

细胞存活率以确定合适的MG132实验浓度。如图1所示，选择1 uM作为MG132在实验中的浓度。

实验分对照组和实验组。实验组蚊细胞用1uM蛋白酶体抑制剂MG132处理，对照组细胞则不做处理（DMSO对照）。在细胞培养液中加入一系列浓度梯度的溴氰菊酯（10^0.5,10, 10^1.5, 100,10^2.5 mg/L）72小时后，用CCK-8法检测细胞的存活率。