[发明专利]用于核酸纯化、蛋白分离的单分散氧化硅磁性微球的制备方法有效
申请号: | 201010556075.X | 申请日: | 2010-11-23 |
公开(公告)号: | CN102151527A | 公开(公告)日: | 2011-08-17 |
发明(设计)人: | 范新文;刘照关 | 申请(专利权)人: | 苏州照康生物技术有限公司 |
主分类号: | B01J13/02 | 分类号: | B01J13/02;H01F1/11;C12N15/11;C07K1/14 |
代理公司: | 南京苏科专利代理有限责任公司 32102 | 代理人: | 王玉国;陈忠辉 |
地址: | 215125 江苏省苏州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 核酸 纯化 蛋白 分离 分散 氧化 磁性 制备 方法 | ||
1.用于核酸纯化、蛋白分离的单分散氧化硅磁性微球的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1)首先将亲水性磁性纳米粒子均匀地分散在水中,置于50~90℃的恒温水浴中,边搅拌边加入氨水和0.01~20.0wt%表面化学修饰剂,经过1~6小时表面化学修饰后,升温至65~95℃并敞开反应体系将过量的氨水蒸发完全,经过洗涤和真空干燥后得到表面亲油疏水性的磁性纳米粒子粉末;将粉末再分散到有机溶剂中,得到磁性纳米粒子有机溶剂分散液,磁性纳米粒子的浓度为0.1~30wt%;
2)将得到的0.1~30wt%的磁性纳米粒子有机溶剂分散液即油相,在0.01~1.0MPa保护气体保护条件下从模板微孔分散器挤出,与含有0.01~10.0wt%表面活性剂的水溶液即水相相接触,逐步生长成油滴;油滴在剪切作用下最终脱离模板微孔分散器表面进入水相中,形成单分散的悬浮液;将悬浮液置于减压反应器中,于30~60℃减压蒸发掉油滴中的有机溶剂,使得富含磁性纳米粒子的油滴收缩成磁性粒子组合体;
3)采用溶胶-凝胶方法对磁性纳米粒子组合体进行氧化硅包覆,以水和有机醇的混合液为溶剂,混合液中水与有机醇的质量比8∶1~1∶8,氨水为催化剂,正硅酸四乙酯为形成壳层的硅源,以磁性纳米粒子组合体为待包覆的基核;将计量的正硅酸四乙酯充分溶解在有机醇中,加入到预先溶解氨水的磁性纳米粒子组合体的水悬浮液中,充分搅拌,于室温反应12~48小时,经洗涤和80~200℃真空干燥后,得到单分散粒径可控、核壳结构的氧化硅磁性微球。
2.根据权利要求1所述的用于核酸纯化、蛋白分离的单分散氧化硅磁性微球的制备方法,其特征在于:步骤1)所述的亲水性磁性纳米粒子为Fe、Co、Ni、Mn、Fe3O4、γ-Fe2O3、FeCo合金、半导体纳米晶中的一种或多种的混合物。
3.根据权利要求1所述的用于核酸纯化、蛋白分离的单分散氧化硅磁性微球的制备方法,其特征在于:步骤1)所述的表面化学修饰剂为十一烯酸、十八烯酸、油菜酸、扁油酸、蓖麻油酸、棕榈油酸、亚油酸、4-乙基辛酸、鲨油酸、亚麻酸中的一种或多种的混合物。
4.根据权利要求1所述的用于核酸纯化、蛋白分离的单分散氧化硅磁性微球的制备方法,其特征在于:步骤1)所述的有机溶剂为环己烷、正己烷、正庚烷、环庚烷、正辛烷、异辛烷、甲苯、二甲苯、环丁酮、甲基乙基酮、戊酮中的一种或多种的混合物。
5.根据权利要求1所述的用于核酸纯化、蛋白分离的单分散氧化硅磁性微球的制备方法,其特征在于:步骤2)所述的表面活性剂为十二烷基硫酸钠、聚乙烯醇、吐温20、吐温80、十二烷基苯磺酸纳、油酸山梨醇酯、十六烷基三甲基溴化铵中的一种或多种的混合物。
6.根据权利要求1所述的用于核酸纯化、蛋白分离的单分散氧化硅磁性微球的制备方法,其特征在于:步骤2)所述的保护气体为氮气。
7.根据权利要求1所述的用于核酸纯化、蛋白分离的单分散氧化硅磁性微球的制备方法,其特征在于:步骤3)所述的有机醇为甲醇、异丙醇、丙醇、乙醇中的一种。
8.根据权利要求1所述的用于核酸纯化、蛋白分离的单分散氧化硅磁性微球的制备方法,其特征在于:步骤3)获得的氧化硅磁性微球的粒径为0.5~50μm。
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