[发明专利]超微型核酸电洗脱仪无效
申请号: | 201010556146.6 | 申请日: | 2010-11-24 |
公开(公告)号: | CN102051357A | 公开(公告)日: | 2011-05-11 |
发明(设计)人: | 孙军 | 申请(专利权)人: | 同济大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人: | 张磊 |
地址: | 200092 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 微型 核酸 洗脱 | ||
技术领域
本发明属于生命医学科学领域,具体涉及一种超微型核酸电洗脱仪(super-mini DNA/RNA electro-eluter)。
背景技术
从凝胶中分离纯化样品是分子生物学实验中常用的技术手段和重要的操作步骤。样品分离纯化的质量直接影响下游研究工作的进行。目前在纯化核酸等分子的实验中,常用的仪器有Bio-rad公司的Model 422 electro-Eluter等仪器,该仪器精巧、适用,可满足大多数实验室分离纯化生物大分子的需求。但是,分离纯化少量核酸样品,特别是纯化易降解的RNA样品时,该仪器显得操作繁琐。一是,设备即便已很精巧,但对于所分离的少量样品而言仍显体积大、配件多、操作环节多等缺点,彻底灭活RNA酶不容易,少量污染即可减少样品RNA得率;二是,该设备某些部件,如Membrane Cap等,处理和安装不当或有气泡,直接影响电洗脱效率,或者无法进行电洗脱过程;三是,电洗脱缓冲液用量较大(700mL左右);四是,全套设备成本较高。
发明内容
本发明的目的在于提供一种超微型核酸电洗脱仪。
本发明提出的超微型核酸电洗脱仪,由电极1、微型电洗脱容器2、含样品胶块3、电洗脱缓冲液4和冷却容器5组成,其中:电极1插入微型电洗脱容器2内,含样品胶块3位于正、负电极1之间,微型电洗脱容器2位于冷却容器5内,微型电洗脱容器2内充满电洗脱缓冲液4。
本发明中,所述电洗脱仪可以组合使用,即若干个微型电洗脱容器2放置于同一个冷却容器5内。
本发明在小于1ml的微型电泳环境中,在低电压下(~50U)、短时间内(~20分钟),即可有效回收PAGE胶中微量核酸分子,尤其适用易降解RNA样品的洗脱回收。
本发明特点在于:(1)操作极简单;(2)样品分离快速;(3)运行成本低;(4)适合易降解RNA等样品的分离和纯化。
本发明与同类产品相比有明显优势。以BIO-Rad公司的model 422 electro-eluter电洗脱仪为例,本发明有如下优点:
表1. model 422 electro-eluter电洗脱仪与超微型电洗脱仪设备成本及耗材比较
附图说明
图1为本发明的结构图示。
图2为本发明实施例2结构图示。
图3. 在model 422型和超微型电洗脱仪洗脱样品中miR-1a的不同扩增曲线,其中: E1a:利用超微型电洗脱仪洗脱后得到样品(示样品得率高); M1a:与前者样品量一样,利用model 422型洗脱仪洗脱后得到样品(示样品得率低)。
图4. 在model 422型和超微型电洗脱仪洗脱样品中miRNA-1b的不同扩增曲线,其中:E1b:利用超微型电洗脱仪洗脱后得到样品(示样品得率高);M1b:与前者样品量一样,利用model 422型洗脱仪洗脱后得到样品(示样品得率低)。
图5. 在model 422型和超微型电洗脱仪洗脱样品中miRNA-2b的不同扩增曲线,其中:E2b:利用超微型电洗脱仪洗脱后得到样品(示样品得率高);M2b:与前者样品量一样,利用model 422型洗脱仪洗脱后得到样品(示样品得率低)。
图中标号:1为电极;2为微型电洗脱容器;3为含样品胶块;4为电洗脱缓冲液;5为冷却容器。
具体实施方式
下面通过实施例进一步说明本发明。
实施例1:
如图1所示,含样品胶块3放置于微型电洗脱容器2内,容器内已装有电洗脱缓冲液4;正、负电极1插入电洗脱缓冲液4,分别置于含样品胶块3两侧;整个微型电洗脱容器外置冷却容器5,防止系统过热;加电后,RNA或DNA样品可从含样品胶块3中泳动而出,进入电洗脱缓冲液4中。收集电洗脱缓冲液4,即可获得高得率样品。
实施例2:如图2所示,显示同时分离4个样品,本装置可根据需要增加样品数量。含样品胶块3放置于微型电洗脱容器2内,容器内已装有电洗脱缓冲液4;正、负电极1插入电洗脱缓冲液4,分别置于含样品胶块3两侧;将4个微型电洗脱容器2置于同一个冷却容器5,防止系统过热;加电后,RNA或DNA样品可从含样品胶块3中泳动而出,进入电洗脱缓冲液4中。分别收集4个电洗脱缓冲液4,即可获得高得率样品。
以BIO-Rad公司的model 422 electro-eluter电洗脱仪和本发明对洗脱样品进行质量比较:
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