[发明专利]食品中苯并芘含量的检测方法

权利要求书

1.一种食品中苯并芘含量的检测方法，其特征是，包括以下步骤：

(1)溶液的配制

a.包被液的配制：将碳酸钠、碳酸氢钠配制成pH7.0-8.0的溶液，低温保存；

b.洗涤液的配制：将氯化钠、十二水磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化钾及吐温20配制成pH7-8的溶液，低温保存；

c.终止液的配制：配制10-15％的浓硫酸；

d.封闭液的配制：将氯化钠、十二水磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化钾、吐温20及牛血清白蛋白配制成pH7-8的溶液，低温保存；

e.底物溶液的配制：将磷酸氢二钠、柠檬酸、H₂O₂及四甲基联苯胺配制成溶液；

(2)抗体固定

将苯并芘多克隆抗体用包被液稀释，以每孔100μl加入酶标板中，同时设立正常血清稀释液的阳性对照，低温过夜保存；将孔中液体倒尽，加入洗涤液，保留3min，再倒尽，如此重复洗涤多次；每孔中添加100μl封闭液，37℃，保留1h；将孔中液体倒尽，加入洗涤液，保留3min，再倒尽，如此重复洗涤多次；

(3)免疫反应

用封闭液稀释待测样品溶液后加入酶标板孔中，100μl/孔，37℃，保留1-2h，孔中液体倒掉，加入洗涤液，保留3min，倒尽，如此重复洗涤多次；用封闭液稀释酶标苯并芘溶液后加入孔中，100μl/孔，37℃，保留1-2h，孔中液体倒掉，加入洗涤液，保留3min，倒尽，如此重复洗涤多次；加入底物溶液，100μl/孔，避光，37℃，10-15min；加入终止液终止反应，100μl/孔；

(4)检测信号的获得

用酶标仪检测酶标板孔中的液体OD值，根据OD值判断样品中苯并芘的含量，根据苯并芘含量的标准曲线可计算出样品中苯并芘的含量大小。

2.按照权利要求1所述的食品中苯并芘含量的检测方法，其特征是：所述重复洗涤的次数为三次。

3.按照权利要求1所述的食品中苯并芘含量的检测方法，其特征是：所述低温为4℃。