[发明专利]从发酵液中直接结晶制备L-精氨酸-α-酮戊二酸盐的工艺有效
申请号: | 201010565020.5 | 申请日: | 2010-11-29 |
公开(公告)号: | CN102020593A | 公开(公告)日: | 2011-04-20 |
发明(设计)人: | 李少平;方佳茂;陈伟滨;许正宏;史劲松;孙志浩 | 申请(专利权)人: | 广东环西生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C07C279/14 | 分类号: | C07C279/14;C07C277/08;C07C59/347;C07C51/41;C07C51/43 |
代理公司: | 揭阳市博佳专利代理事务所 44252 | 代理人: | 黄镜芝 |
地址: | 515343 广东省揭*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 发酵 直接 结晶 制备 精氨酸 酮戊二酸盐 工艺 | ||
1.一种从发酵液中直接结晶制备L-精氨酸-α-酮戊二酸盐的工艺,其特征在于:所需原料L-精氨酸和α-酮戊二酸是以植物来源的淀粉葡萄糖为碳源,用非转基因的野生型微生物进行代谢发酵而得到的发酵产物,简称发酵液,制备的工艺包括发酵液预处理、螯合、浓缩、结晶、溶解脱色、重结晶和晶体干燥,L-精氨酸发酵液预处理,去除菌体和大分子杂质,加入同步进行净化处理的一定量的α-酮戊二酸发酵滤液进行混合,即螯合,经真空蒸发浓缩,再采用降温结晶方式获得L-精氨酸α-酮戊二酸盐的粗品,粗品经溶解脱色,并进行有机溶剂重结晶,最终经干燥获得高纯度的L-精氨酸α-酮戊二酸盐。
2.根据权利要求1所述的从发酵液中直接结晶制备L-精氨酸-α-酮戊二酸盐的工艺,其特征在于:所述的发酵液预处理工艺是将L-精氨酸发酵液和α-酮戊二酸发酵液分别进行絮凝、过滤或离心,除去菌体和较大固体粒子,获得L-精氨酸和α-酮戊二酸澄清发酵滤液的过程,所述的絮凝操作是采用硫酸铝、氯化钙、聚丙烯酰胺、壳聚糖等絮凝剂或其他商品化的无机铝盐、铁盐、钙盐、高分子絮凝剂;所述的过滤操作,是采用板框过滤、真空过滤或带式过滤等设备进行过滤,尤其适合规模化制备工艺;所述的离心操作是采用离心分离设备进行固液分离,尤其适合小试制备过程。
3.根据权利要求1所述的从发酵液中直接结晶制备L-精氨酸-α-酮戊二酸盐的工艺,其特征在于:所述的螯合工艺,是根据滤液中L-精氨酸的含量,加入一定量的α-酮戊二酸发酵滤液,或α-酮戊二酸溶液进行螯合反应的过程,α-酮戊二酸的加入摩尔含量,是体系中L-精氨酸摩尔量的0.3~1.5倍。
4.根据权利要求1所述的从发酵液中直接结晶制备L-精氨酸-α-酮戊二酸盐的工艺,其特征在于:所述的浓缩工艺,是对含有L-精氨酸和α-酮戊二酸的螯合溶液进行浓缩的过程,使AAKG 达到过饱和状态,优选的浓缩设备是真空浓缩、二效浓缩或三效浓缩装备,溶液浓缩到L-精氨酸和α-酮戊二酸原溶液混合液体积的15%~50%。
5.根据权利要求1所述的从发酵液中直接结晶制备L-精氨酸-α-酮戊二酸盐的工艺,其特征在于:所述的结晶工艺,是将浓缩液放置在温度-5℃~15℃下进行结晶,或使用结晶锅,通过冷却液进行溶液冷却,结晶过程控制在4~50 h,结束后采用过滤或离心收集晶体。
6.根据权利要求1所述的从发酵液中直接结晶制备L-精氨酸-α-酮戊二酸盐的工艺,其特征在于:所述的溶解脱色工艺,是将上述晶体重新溶解在2~5倍重量份的去离子水中,搅拌使其充分溶解后,加入颗粒活性碳进行脱色,活性碳加入量相当于AAKG晶体质量的0.5%~3.0%,搅拌并将溶液加热至40~90℃,并维持20~60分钟,再通过板框过滤,收集AAKG滤液。
7.根据权利要求1所述的从发酵液中直接结晶制备L-精氨酸-α-酮戊二酸盐的工艺,其特征在于:所述的重结晶工艺,是在上述AAKG滤液中,缓慢加入溶液体积的1~4倍的亲水性有机溶剂,室温或降温进行重结晶8~50 h,过滤收集晶体,并以少量溶剂洗涤2~3次,所述的亲水性有机溶剂,包括乙醇、甲醇、丙酮、异丙醇、甘油和乙腈,其中优选的溶剂为乙醇或丙酮。
8.根据权利要求1所述的从发酵液中直接结晶制备L-精氨酸-α-酮戊二酸盐的工艺,其特征在于:所述的晶体干燥工艺,是采用真空干燥、热风循环烘箱或气流干燥设备进行晶体干燥,其干燥温度50℃~150℃。
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