[发明专利]一种银染增强技术胶体金免疫层析试纸盒及其制备方法

说明书

 技术领域

本发明提供一种银染增强技术胶体金免疫层析试纸盒，用于提高胶体金免疫层析试纸条的检测性能，本发明还公开了上述试纸盒的制备方法及在试纸条检测中的应用，属于生物检测领域。

背景技术

胶体金探针是20世纪70年代发展起来的一门新技术。特别引人注目的是以膜为固相载体的胶体金快速诊断技术，该技术是20世纪80年代在酶联免疫吸附试验、乳胶凝集试验、单克隆抗体技术、胶体金免疫技术和新材料技术基础上发展起来的一项新型体外诊断技术。近年来该技术已越来越受到人们的重视，其技术发展迅速，在生物医学领域特别是人类医学、兽医学检验中得到了广泛应用。

胶体金免疫层析测试条是结合免疫胶体金与对应抗原（抗体）的反应特异性和层析技术而制成的。一个胶体金免疫层析测试条通常由加样区、反应区和吸附区三部分组成。加样区含有免疫胶体金颗粒，通常由玻璃纤维将免疫胶体金颗粒吸附在该区；反应区则喷涂或点加两条反应线，一条为检测线，一条为质控线。检测线用以检测此处（抗原）物质与免疫胶体金颗粒的包被抗原（抗体或抗体携带的抗原）的反应性；质控线则用以检测免疫胶体金颗粒上的包被蛋白质的活性及程度，免疫胶体金颗粒由加样区释放后，经反应区，部分继续到吸附区，完成层析，从而达到快速检测的目的。

银染增强技术主要成分是还原剂和银盐溶液。在还原剂的作用下，银离子容易以纳米金颗粒为核心，聚集在纳米金颗粒的表面还原成银原子，这样，纳米级大小的颗粒通过银离子的聚集和还原就可以变成毫米级的颗粒，因此，纳米金颗粒的信号得到放大。

经检索未见有本银染增强技术应用于胶体金免疫层析试纸条，以增强其检测性能公开的文献报道。

发明内容

本发明的目的是公开一种银染增强技术胶体金免疫层析试纸盒，适合现场快速检测，具有特异性强，灵敏度高，操作简便特点。

本发明还提供了上述免疫层析试纸盒的制备方法，适用于批量生产。

本发明的银染增强技术胶体金免疫层析试纸盒，包含：一个胶体金免疫层析试纸条；两片底膜，其中含有银盐溶液；两片顶膜，其中含有参与银盐还原反应的还原剂；一个塑料滴管和一个塑料镊子。

本发明免疫层析试纸盒的胶体金免疫层析试纸条可为所有胶体金免疫层析试纸条，其结构为样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水滤纸按从上到下依次固定于PVC膜板上，其中结合垫包被有胶体金标记物，其结果的判定为硝酸纤维素膜上的检测线和质控线是否结合胶体金标记物为依据。

本发明免疫层析试纸盒的底膜是将未处理过的玻璃纤维素膜于硝酸银溶液中浸泡1分钟，取出后避光干燥处理，干燥后的底膜裁成适当大小密封避光保存。

本发明疫层析试纸盒的顶膜是将未处理过的玻璃纤维素膜于对苯二酚溶液中浸泡1分钟，取出后避光干燥处理，干燥后的顶膜裁成适当大小密封避光保存。

本发明银染增强技术胶体金免疫层析试纸盒的制备方法，包括以下主要步骤：

1）免疫层析试纸条的制备

将样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水滤纸按从上到下依次固定于PVC膜板上制备免疫层析试纸条，其中结合垫包被有胶体金标记物，硝酸纤维素膜上包被检测线和质控线。

）底膜和顶膜的制备

将底膜于硝酸银溶液中浸泡1分钟，60℃避光干燥，将处理好的底膜装于不透明的密封袋内保存。

将顶膜于对苯二酚溶液中浸泡1分钟，60℃避光干燥，将处理好的顶膜装于不透明的密封袋内保存。

）银染增强胶体金免疫层析试纸盒的组装

将装有底膜的不透明的密封袋；装有底膜的不透明的密封袋；免疫层析试纸条；加样滴管和镊子装于试纸盒内。

本发明的积极效果在于：利用胶体金免疫层析技术和银染技术制备免疫层析试纸盒，既增强了胶体金免疫层析试纸条的检测灵敏度，也保留了其特异性强的特点。本发明免疫层析试纸盒其中银染增强技术可适用于所有胶体金免疫层析试纸条，本发明免疫层析试纸盒适合于临床和突发事件的现场检测，适合流行病学调查，具有操作简单，灵敏度高、稳定性好、检测快速、结果清楚，易于判断和保存，且无需任何仪器设备等优点，尤其适合于临床和突发事件的现场检测，适合流行病学调查大规模应用。

附图说明

图1为胶体金试纸盒的检测结果图；

其中，1、1ng/mL毒素样品检测结果；2、100 pg/mL毒素样品检测结果；3、阴性结果。

具体实施方式