[发明专利]一种B群链球菌选择性培养基、鉴定培养基及其使用方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生物培养基，尤其涉及一种B群链球菌选择性培养基。

背景技术

B群链球菌（GBS）又称无乳链球菌，属于革兰氏阳性菌，是栖息在人体胃肠道和下生殖道的正常菌群，从20世纪70年代以来，GBS逐渐成为新生儿严重感染性疾病的重要致病菌之一，已经引起全世界的广泛关注。GBS感染是引起围产期胎儿宫内感染、新生儿肺炎、败血症、脑膜炎等严重感染的主要原因。可引发早产，胎儿发育迟缓（低出生体重儿）、胎膜早破及晚期流产等严重后果，在围产期医学中占重要地位。

新生儿GBS感染主要是由母亲的垂直感染而来，据报道产房阴道带菌率相当高，相关报道在4.6-35%之间不等，GBS不仅带菌率高，而且感染后具有发病率和病死率高的特点，有研究报道美国新生儿GBS感染的发病率达全部活产婴儿的1.9-3.7‰，病死率在不采取药物干预的情况下高达50%，适当的药物干预可降至5-6%。而据报道2003年美国早产儿感染GBS的病死率仍高达22%。另一方面，感染GBS的存活婴儿也多有严重的后遗症，如智力发育迟缓，视力或听力受损等，脑膜炎存活儿中15-30%有神经系统后遗症。据流行病学调查统计显示，GBS感染率呈上升趋势，排除随着培养技术水平的提高，GBS检出率可能上升的因素外，这种趋势可能与人们的生活方式的改变及其他一些尚未明了的因素亦有一定的关系。Regan等通过对妊娠期母亲GBS感染与新生儿GBS败血症的关系发现，孕中期母亲带菌，其新生儿GBS败血症发病率为2.6‰；而产时母亲带菌，其新生儿败血症发病率大大提高，为16‰，两组结果均明显高于母亲无GBS感染的新生儿败血症发病率。

抗生素预防（intrapartum antibiotic prophylaxis,IAP），即在分娩过程中给予青霉素或氨苄青霉素静脉滴注可以降低新生儿感染的发病率和死亡率，目前认为IAP可以暂时清除阴道菌落，减少新生儿出生时感染的风险，并且抗生素可以通过胎盘，可以对先前的感染进行治疗。在美国，由于IAP的广泛开展，孕妇GBS感染率下降达21%，新生儿早期GBS感染的发生率已由1.7‰降至0.6‰，但是对于不携带GBS的孕妇不宜使用IAP，所以及时而准确的发现孕产妇是否携带GBS是降低GBS感染和致病的关键。

目前，在对孕产妇是否携带GBS进行筛查的时候主要有两种方法，第一种是使用检测试剂盒进行快速诊断。但是通过检测试剂盒进行快速诊断对操作的要求和成本均比较高，限制了检测试剂盒的推广应用。第二种，也就是目前最常见的方法，是利用培养基对取得的样品进行培养，然后通过直接观察法、革兰氏染色法、触酶试验、协同溶血（CAMP）试验等判断是否感染GBS。但是孕妇生殖道和直肠有多种细菌存在，而目前的培养基不能有效抑制GBS以外的其他菌的生长，这些细菌生长速度快，常使GBS菌生长受到抑制，造成GBS菌漏检。

发明内容

为了克服现有技术的上述不足，本发明提供了一种能够特异性的扩增B群链球菌的选择性培养基，能够抑制其他细菌的生长，如果样品中存在B群链球菌则可正常生长为优势菌，为后续的鉴定工作带来了极大的便利，提高了B群链球菌的检测正确率和检测效率。

本发明的另一目的在于，提供一种B群链球菌鉴定培养基，包括选择性培养基和转运培养基，在提高B群链球菌的检测正确率和检测效率的同时，极大的便利了B群链球菌的取样。

本发明还提供了上述两种培养基的使用方法，所述方法操作简单，不需要特殊的仪器设备。

一种B群链球菌选择性培养基，以1000mL计包含以下组分：

心脏浸出物 1-10g；新蛋白胨 1-50g；右旋葡萄糖 1-10g；NaCl 1-10g；Na₂HPO₄ 0.1-5g；Na₂CO₃ 1-10g；庆大霉素 1-50mg；萘啶酮酸 1-50mg；余量由水补足。

优选的，所述B群链球菌选择性培养基，以1000mL计包含以下组分：

心脏浸出物 2-7g；新蛋白胨 10-30g；右旋葡萄糖 1.5-5g；NaCl 1.5-5g；Na₂HPO₄ 0.2-1g；Na₂CO₃ 1.5-5g；庆大霉素 4-20mg；萘啶酮酸 5-25mg；余量由水补足。

上述任一方案中更优选的，所述B群链球菌选择性培养基还包含终浓度为5-50mg/L的氟康唑。氟康唑能够抑制真菌的生长。