[发明专利]一种合成胸腺肽α1的分离纯化方法无效
| 申请号： | 201010566609.7 | 申请日： | 2010-11-25 |
| 公开（公告）号： | CN102477094A | 公开（公告）日： | 2012-05-30 |
| 发明（设计）人： | 许晓;吉春;熊国裕 | 申请（专利权）人： | 北京凯因科技股份有限公司;北京凯因生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/575 | 分类号： | C07K14/575;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/18 |
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| 地址： | 100176 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 合成 胸腺肽 分离 纯化 方法 | ||
1.一种合成胸腺肽α1的分离纯化方法，包括
(1)用离子交换色谱纯化合成的粗肽；
(2)反相液相色谱进一步精制纯化经离子交换色谱处理后的多肽；
(3)将精制后的多肽浓缩，除去其中的有机溶剂；
(4)浓缩液转盐、冻干干燥得成品；
其中，所述的浓缩是采用膜过滤浓缩。
2.权利要求1中的分离纯化方法，其中所述的膜过滤浓缩是纳滤膜浓缩，纳滤膜孔径为50-1000道尔顿。
3.权利要求1或2所述的分离纯化方法，其中所述的膜过滤所用的膜为耐有机溶剂的滤膜。
4.权利要求1所述的分离纯化方法，其中所述的离子交换柱纯化合成的粗肽中，所用的离子交换柱为阴离子交换柱。
5.权利要求3所述的分离纯化方法，其中所述的阴离子交换柱为DEAEsepharose Fast Flow离子交换柱。
6.权利要求1所述的分离纯化方法，其中阴离子交换柱的洗脱液为pH为5.8的PB缓冲液A和pH为5.8的PBS缓冲液B，梯度洗脱。
7.权利要求1所属的分离纯化方法，其中反相液相色谱柱为C18反相液相色谱柱。
8.权利要求1所述的分离纯化方法，其中反相液相色谱洗脱系统为含0.1％TFA的12％的乙腈水溶液和含0.1％TFA的20％的乙腈水溶液系统，梯度洗脱。
9.权利要求1所述的分离纯化方法，其中所述的转盐步骤中为采用反相色谱转盐，转盐缓冲液为醋酸溶液，转盐洗脱液为乙腈水溶液。
10.权利要求9所述的分离纯化方法，其中所述的醋酸缓冲液为0.05-0.5mol/L的醋酸溶液，所述的乙腈水溶液为质量百分数5％-30％的乙腈水溶液。
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