[发明专利]丽格海棠组织培养的接种方式

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养领域，特别是丽格海棠组织培养的领域。

背景技术

丽格海棠(Rieger begonia)为秋海棠科(Regoniaceace)秋海棠属的多年生草本花卉，是球根海棠和野生秋海棠的杂交品系。丽格海棠花型花色丰富，多为重瓣，花期长达半年以上，特别是花期正值元旦、春节，具有极高的观赏价值和经济价值。但丽格海棠却存在开花后结籽少，又无块茎，茎段扦插成活率低的缺点，不利于大量繁殖，组织培养虽然能在短期内获得大量种苗，使生产成本降低，为商品化生产提供优质种苗。但是生长效果不均，长势不齐，影响生产而创造的价值。

发明内容

针对上述状况和现有技术的不足，本发明提供一种丽格海棠组织培养的接种方式。

丽格海棠组织培养的接种方式，其特征是：选取丽格海棠植株上已展平的幼叶，清洗消毒，然后剪去叶片的边缘，并将叶片切成0.6～1.5cm²大小，将丽格海棠叶片按反放(叶上表面紧贴培养基)的接种方式接种到诱导培养基中，接种后采取旋转方式培养。

所述的叶片切成1cm²大小。

所述的旋转方式转速为80rpm。

所述的每片小块最好有一个较大的主脉。

所述的清洗消毒是指，清洗表面后，再用蒸馏水冲洗干净，于无菌环境下用含75％酒精的棉球擦拭叶片表面后，放入0.1％～0.2％的汞溶液中消毒6～10min，用无菌水洗3～4次，每次4～5min。

所述的诱导培养基为MS固体培养基每升附加6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)0.5mg，NAA(α-萘乙酸)0.1mg，蔗糖30g，pH值为6.0，120C湿热高压灭菌20min。

所述的培养环境为温度22℃±2，相对湿度70％～80％，光强3000lux，光照12h/d。

与传统的接种方式相反，本发明的优点在于：能够使丽格海棠叶片外植体更加有利于养分和水分的吸收，而且褐变率低，膨大率高，叶片生长势提高了，生长情况稳定，另外，这一发明提高了丽格海棠规模化生产的效率，也提高了观赏价值和经济价值。

具体实施方式

本实验分为发明组和实验组，每组处理50个100ml三角瓶，每个100ml三角瓶中接种5片。

选取丽格海棠植株上已展平的幼叶，清洗表面后，再用蒸馏水冲洗干净，于无菌条件下用75％酒精棉球擦拭叶片表面后，放入0.1～0.2％的升汞溶液中消毒6～10min，之后用无菌水洗3～4次，每次4～5min.然后将叶片放在无菌滤纸上吸干叶片上的水分，用灭菌手术剪，剪去叶片的边缘，并将叶片切成1cm²大小，每片最好有一个较大的主脉。再将丽格海棠叶片接种到诱导培养基中，培养基成分为MS(注释)+6-BA 0.5mg/L+NAA0.1mg/L。注：6-BA：6-苄氨基腺嘌呤；NAA：α-萘乙酸，都是植物生长调节剂。接种后采取旋转方式培养(转速为80rpm)。

实施例：

发明组：

将丽格海棠叶片按反放(叶上表面紧贴培养基)的接种方式接种到诱导培养基中培养，采取上述实施方式进行培养，培养1周后开始观察褐变率和膨大率，每周观察记录一次。

对照组：

将丽格海棠叶片按正放(叶下表面紧贴培养基)的接种方式接种到诱导培养基中培养，采取上述实施方式进行培养，培养1周后开始观察褐变率和膨大率，每周观察记录一次。

正反接种的效果比较(褐变率)：

正反接种的效果比较(膨大率)：

注：MS培养基配制成分表：