[发明专利]一种提取安普霉素的方法有效
申请号: | 201010569770.X | 申请日: | 2010-11-26 |
公开(公告)号: | CN102477052A | 公开(公告)日: | 2012-05-30 |
发明(设计)人: | 徐红;蔡丽;赵德 | 申请(专利权)人: | 北大方正集团有限公司;北大国际医院集团重庆大新药业股份有限公司;北大国际医院集团有限公司 |
主分类号: | C07H15/22 | 分类号: | C07H15/22;C07H1/06;B01D15/04 |
代理公司: | 北京天昊联合知识产权代理有限公司 11112 | 代理人: | 丁业平;张天舒 |
地址: | 100871 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提取 霉素 方法 | ||
1.一种提取安普霉素的方法,该方法包括以下步骤:
1)将生产氨基甲酰妥布霉素的黑暗链霉菌(Streptomyces tenebrarius)发酵液吸附到第一阳离子型树脂上,用第一洗脱剂洗脱,收集洗脱液,从而得到含有安普霉素的氨基甲酰妥布霉素粗溶液;
2)将所述的含有安普霉素的氨基甲酰妥布霉素粗溶液进行水解得到含有安普霉素的妥布霉素粗溶液;
3)将所述的含有安普霉素的妥布霉素粗溶液吸附到第二阳离子型树脂上,用第二洗脱剂洗脱,收集含有安普霉素的洗脱液组分,从而得到安普霉素溶液。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤1)中,将所述发酵液先酸化至pH5-6,再用所述第一阳离子型树脂进行吸附,并用氨水进行洗脱。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,在步骤1)中,所述第一阳离子型树脂为强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤2)中,所述水解为加热水解,水解温度为80-90℃,水解时间为1-3小时。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,在步骤2)中,在所述水解之前,将所述的含有安普霉素的氨基甲酰妥布霉素粗溶液的氨基甲酰妥布霉素浓度调节至2×104-3×104μ/ml。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤3)中,将所述的含有安普霉素的妥布霉素粗溶液先调节pH至8-9,再用所述第二阳离子型树脂进行吸附,并用氨水进行洗脱。
7.如权利要求6所述的方法,其特征在于,在步骤3)中,在所述的用氨水进行洗脱的过程中,采用TLC薄层层析法对洗脱液组分进行监测,其中所述TLC薄层层析法以纯安普霉素为标准点位,当洗脱液组分的供试液的点位与安普霉素点位符合时,收集对应的含有安普霉素的洗脱液组分。
8.如权利要求6所述的方法,其特征在于,在步骤3)中,所述第二阳离子型树脂为大孔丙烯酸系弱酸性阳离子交换树脂。
9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,该方法还包括:
4)将所得到的安普霉素溶液进一步纯化,其中,将所述安普霉素溶液用第二阳离子型交换树脂和第三阴离子型交换树脂串联柱进行纯化,并进行结晶,得到安普霉素。
10.如权利要求9所述的方法,其特征在于,所述第二阳离子型交换树脂为大孔丙烯酸系弱酸性阳离子交换树脂,所述第三阴离子型交换树脂为强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂。
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